Rotor-Gene Multiplex PCR Kit

用于在Rotor-Gene PCR仪上超快速的两步法多重qRT-PCR基因表达分析

在Rotor-Gene PCR仪上获得超快速、可靠的结果
单管内灵敏检测多个靶序列
表现优越的多重PCR，无需优化
准确检测靶基因的微小差异

Rotor-Gene Multiplex PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和其他Rotor-Gene PCR仪，进行超快速、高度可靠的多重定量两步法RT-PCR，使用序列特异性探针。通过调整热循环仪，可在同一反应中同时定量分析多达4个cDNA靶基因（如1个对照基因和3个靶基因）。特殊优化的预混液配合独特的Rotor-Gene PCR仪，表现卓越。为方便使用，预混液可储存在2–8°C。

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产品		货号	目录价：
Rotor-Gene Multiplex PCR Kit (80) Trial kit for 80 x 25 µl reactions: 1 ml 2x Rotor-Gene Multiplex PCR Master Mix, 2 ml RNase-Free Water		204772	询价
Rotor-Gene Multiplex PCR Kit (400) For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x Rotor-Gene Multiplex PCR Master Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water		204774	询价

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Rotor-Gene Multiplex PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。

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采用双重两步法real-time RT-PCR，配合Rotor-Gene Multiplex PCR Kit和自行设计的TaqMan探针在Rotor-Gene Q实时荧光定量PRC仪上检测[A] IL8（白细胞介素-8）和[B] ACTB（β-actin）。10倍稀释白细胞cDNA模板从100 ng到1 pg，PCR扩增效率高，大约为95%。[C] 获得的C_T值与那些存档的在不同反应管中反应获得的C_T值相当，由此表明该双重分析的可靠性。|用10倍稀释的人白细胞cDNA（10 ng到10 pg）作为模板进行4重real-time PCR。反应使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪和Rotor-Gene Multiplex PCR Kit或供应商S提供的仪器或试剂盒，重复进行三次反应。[A]相应探针扩增的靶基因和荧光颜色。[B]4个靶基因的C_T值（供应商S提供的仪器和试剂盒不能检测IFNG；N.D.）。Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪上较低的C_T值表明QIAGEN的产品有更高的灵敏度。[C]使用Rotor-Gene Multiplex PCR Kit的TNF扩增曲线。[D]使用供应商S试剂盒的TNF扩增曲线。[E]使用Rotor-Gene Multiplex PCR Kit的IFNG扩增曲线。[F]使用供应商S试剂盒的IFNG扩增曲线。|[A] Q-Bond in Rotor-Gene Multiplex PCR Master Mix increases the affinity of DNA polymerase for short single-stranded DNA, reducing primer annealing time to a few seconds. In addition, the unique buffer composition supports the melting of DNA, reducing denaturation and extension times. [B] Without Q-Bond, the primer and polymerase bind sequentially to the template, increasing primer annealing time.|Rotor-Gene Multiplex PCR Kits provide a simple procedure for quantitative, multiplex, real-time PCR. In contrast to current methods, the kits eliminate the need for optimization of the concentrations of primers, Mg²⁺, and Taq DNA polymerase, even for difficult assays (e.g., assays in which the copy number of the target gene is much smaller than that for the reference gene).|[A] NH₄⁺防止引物与模板的非特异性结合。[B]MP合成因子是创新的PCR添加剂，能够提高模板处局部的引物浓度，与K⁺和其他离子一起，MP合成因子能够特异性稳定结合的引物，使HotStarTaq Plus DNA Polymerase作用下的引物延伸更加高效。|

性能

使用Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit，多达4个cDNA靶基因可在单管内同步快速定量分析，提高通量的同时，节约珍贵的样本（参见 "Reliable multiplex analysis" and "Reliable duplex analysis"）。多重分析中不同表达水平的靶基因在同一个反应管中以同样的效率扩增，可确保可靠的相对定量分析。

原理

扩增参照和靶基因在同一个反应管中，减少操作误差，提高了基因定量分析的可靠性。Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit确保在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行可靠的多重cDNA靶基因定量分析，无需优化反应和循环条件（参见"QIAGEN multiplex kits"）。平衡的K⁺和NH4⁺离子组合确保高度特异性，促进特异性引物退火，PCR特异性高、灵敏度好。一种新颖的PCR添加剂合成的Factor MP专用于多重PCR应用，能够以同样的效率扩增在同一反应中不同的扩增子（参见 "Unique PCR buffer"）。

一种新颖的PCR添加剂Q-Bond可缩短扩增时间，确保快速扩增的同时不影响表现（参见"Fast primer annealing"）。此外，高度严谨的热启动酶HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95ºC条件下只需5分钟即可快速激活。

2x Rotor-Gene Multiplex PCR Kit*的组分
组分	特性	优势
HotStarTaq Plus DNA聚合酶	95ºC条件下5分钟激活	室温下建立qPCR反应体系
Rotor-Gene Multiplex PCR缓冲液	NH4⁺和K⁺平衡组合预混液	特异性引物退火，确保可靠的qPCR结果
	合成的Factor MP	在同一反应管中可靠的进行多达4个基因的多重分析
	独特的Q-Bond添加剂	更快速的PCR循环，快速获得结果，一天可进行更多的反应

操作流程

应用即用型预混液无需优化反应和循环条件。只需在预混液中添加模板cDNA和引物探针对，然后设置PCR仪即可开始实验。试剂盒中提供的操作手册中列出了推荐染料，并为多重qPCR分析提供了单独的实验方案。

为了两步法定量RT-PCR获得更加优化的结果，推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒只需20分钟即可快速合成cDNA，并可完全去除基因组DNA的污染。

应用

Rotor-Gene Multiplex PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪，使用序列特异性探针进行快速的两步法RT-PCR分析。该试剂盒也与Rotor-Gene 3000和Rotor-Gene 6000兼容。多达4个cDNA靶基因可在单管内同步快速定量分析，提高通量的同时，节约珍贵的样本。

Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit用于Rotor-Gene PCR仪上，使用序列特异性探针对RNA靶分子进行超快速的一步法qRT-PCR多重分析。

特点	参数
应用	Real-time quantification of genomic DNA or cDNA targets in a multiplex format
描述	For ultrafast quantitative multiplex real-time PCR and two-step RT-PCR using sequence-specific probes
反应类型	Real-time PCR and two-step RT-PCR
real-time或终点法PCR	Real-time
样本/目标类型	DNA, cDNA
单一或多重	Multiplex
SYBR Green I或序列特异性探针	Sequence-specific probes
热循环仪	Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
有/无ROX	Without ROX dye

产品介绍与指南

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	(EN) - Rotor-Gene Q - Pure Detection Now with even more applications!	显示更多

常见问题

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	How do you achieve fast cycling, yet still deliver the same performance in PCR as that achieved with standard cycling? FAQ ID -1430	浏览
	Are Rotor-Gene Kits compatible with reaction setup using the QIAgility instrument? FAQ ID -2116	浏览
	Do the master mixes in Rotor-Gene Kits contain dUTP to allow UNG pretreatment? FAQ ID -2117	浏览
	Why is the initial activation step different for Rotor-Gene Probe, SYBR Green and Multiplex Kits? FAQ ID -2118	浏览
	What are the main differences between Rotor-Gene and QuantiTect or QuantiFast PCR Kits? FAQ ID -2119	浏览
	Will Rotor-Gene Kits also work on the Rotor-Gene 6000 and 3000 cyclers? FAQ ID -2121	浏览
	Do limiting primer concentrations need to be determined when using the Rotor-Gene Multiplex PCR Kit? FAQ ID -2128	浏览
	If housekeeping and target genes differ significantly in abundance, will they both be amplified with equal efficiency using the Rotor-Gene Multiplex PCR Kit? FAQ ID -2129	浏览
	Are probes other than TaqMan® probes, such as FRET probes, compatible with fast cycling with the Rotor-Gene Multiplex PCR Kit? FAQ ID -2130	浏览
	Are TaqMan® Gene Expression Assays from Applied Biosystems compatible with the Rotor-Gene Multiplex PCR Kit? FAQ ID -2131	浏览
	Do you have any information or guidelines regarding the choice of reference genes for real-time PCR? FAQ ID -2371	浏览
	What real-time cycler should I use for my qPCR experiments? FAQ ID -2670	浏览

试剂盒操作手册

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	(EN) - Rotor-Gene Multiplex Handbook For fast multiplex real-time PCR, two-step RT-PCR, and one-step RT-PCR using sequence-specific probes on Rotor-Gene cyclers	显示更多

技术资讯

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	(EN) - Critical factors for synthesis of cDNA for real-time PCR analysis	显示更多
	Overcoming the challenges of real-time, multiplex PCR - (EN)	显示更多

安全数据表

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	Safety Data Sheets Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.	浏览

安全数据表

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	MSDS Rotor-Gene Multiplex PCR Kit (80)
	MSDS Rotor-Gene Multiplex PCR Kit (400)

图片

可靠的双重分析。

可靠的多重分析。

用10倍稀释的人白细胞cDNA（10 ng到10 pg）作为模板进行4重real-time PCR。反应使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪和Rotor-Gene Multiplex PCR Kit或供应商S提供的仪器或试剂盒，重复进行三次反应。[A]相应探针扩增的靶基因和荧光颜色。[B]4个靶基因的C_T值（供应商S提供的仪器和试剂盒不能检测IFNG；N.D.）。Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪上较低的C_T值表明QIAGEN的产品有更高的灵敏度。[C]使用Rotor-Gene Multiplex PCR Kit的TNF扩增曲线。[D]使用供应商S试剂盒的TNF扩增曲线。[E]使用Rotor-Gene Multiplex PCR Kit的IFNG扩增曲线。[F]使用供应商S试剂盒的IFNG扩增曲线。

Fast primer annealing.

[A] Q-Bond in Rotor-Gene Multiplex PCR Master Mix increases the affinity of DNA polymerase for short single-stranded DNA, reducing primer annealing time to a few seconds. In addition, the unique buffer composition supports the melting of DNA, reducing denaturation and extension times. [B] Without Q-Bond, the primer and polymerase bind sequentially to the template, increasing primer annealing time.

Successful Multiplex PCR-Based Genotypic Analysis without the Need for Optimization

QIAGEN multiplex kits.

Rotor-Gene Multiplex PCR Kits provide a simple procedure for quantitative, multiplex, real-time PCR. In contrast to current methods, the kits eliminate the need for optimization of the concentrations of primers, Mg²⁺, and Taq DNA polymerase, even for difficult assays (e.g., assays in which the copy number of the target gene is much smaller than that for the reference gene).

Unique Type-it Microsatellite PCR Buffer Promotes Stable and Efficient Annealing

独特的PCR缓冲液。

[A] NH₄⁺防止引物与模板的非特异性结合。[B]MP合成因子是创新的PCR添加剂，能够提高模板处局部的引物浓度，与K⁺和其他离子一起，MP合成因子能够特异性稳定结合的引物，使HotStarTaq Plus DNA Polymerase作用下的引物延伸更加高效。