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Rotor-Gene Probe PCR Kit

用于在Rotor-Gene PCR仪上使用序列特异性探针超快速进行两步法qRT-PCR

  • 灵敏检测低拷贝数基因
  • 大范围模板量内确保准确的检测
  • Rotor-Gene PCR仪上超快速、可靠的结果
  • 专用的即用型预混液确保快速循环
Rotor-Gene Probe PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和其他Rotor-Gene PCR仪,使用序列特异性探针采用定量两步法RT-PCR可超快速、高度灵敏的定量cDNA靶分子。特殊优化的预混液配合独特的Rotor-Gene PCR仪,表现卓越。预混液可贮存在2–8°C,方便使用。

Cat No./ID: 204374
Rotor-Gene Probe PCR Kit (400)
For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x Rotor-Gene Probe PCR Master Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water

Rotor-Gene Probe PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
灵敏、可重复的检测。
使用2倍稀释的基因组DNA(30 ng到3.75 ng)和自行设计的TaqMan探针对IL1R2(白介素1受体Ⅱ)进行real-time PCR。反应使用[A] Rotor-Gene Probe PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪或[B]供应商AII提供的试剂盒和循环仪(每个稀释样本重复五次反应)。Rotor-Gene体系能够检测到较低的CT值,有更好的重复性以及对不同浓度模板的较高的分辨率。
1
real-time PCR准确度高。
使用Rotor-Gene Probe PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪对人基因组DNA进行real-time PCR分析。[A] 2倍稀释的DNA(从30 [5000拷贝]到0.06 ng[20拷贝])使用自行设计的TaqMan探针对IL1R2(白介素1受体Ⅱ)进行分析;每个浓度模板重复五次。相邻浓度模板间的CT值平均差1.07个循环。[B] 5 ng DNA使用自行设计的TaqMan探针对IL1R2进行分析。100次重复实验的标准偏差为0.21。[C] 20 ng DNA使用自行设计的TaqMan探针对ACTB(β-actin)进行分析。100次重复实验的标准偏差为0.29。
2
对1个细胞也能可靠检测。
使用4倍稀释的人基因组DNA(相当于从16, 666个细胞到1个细胞)和自行设计的TaqMan探针对ACTB(β-actin)进行real-time PCR分析。反应使用Rotor-Gene Probe PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪进行,重复三次实验。Rotor-Gene体系在整个浓度范围内检测可靠且重复性好。
3
宽泛的线性范围。
使用10倍稀释的质粒DNA(109 到10个拷贝)和自行设计的TaqMan探针对PPIA(亲环素A)进行real-time PCR分析。反应使用Rotor-Gene Probe PCR Kit和Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪进行,重复三次实验。Rotor-Gene体系在整个浓度范围内检测可靠且CT值重复性好。
Performance

Rotor-Gene Probe PCR Kit非常适合定量PCR分析(参见"Highly sensitive and reproducible detection", "High precision in real-time PCR"),以及在大范围模板量内提供可靠的检测(参见"Reliable detection down to 1 cell", 和 "Wide dynamic range")。

在大范围模板量内可靠检测
拷贝数 平均CT CT差异
1,000,000,000 5.11 3.07
100,000,000 8.18 3.39
10,000,000 11.57 3.04
1,000,000 14.61 3.68
100,000 18.29 3.28
10,000 21.57 3.68
1,000 25.25 3.06
100 28.31 3.43
10 31.74
有效性 0.99
线性 1
Real-time PCR使用10倍稀释的质粒DNA(109至10个拷贝)和为PPIA(cyclophilin A)自己设计的TaqMan分析。
Principle

Rotor-Gene Probe PCR Kit能够在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上可靠的定量两步法RT-PCR,无需优化反应或循环条件。该试剂盒专为水解探针(如TaqMan探针)而设计。含有K+和NH4+平衡组合的预混液促进高特异性引物退火,确保高度灵敏和特异性扩增(参见"Specific primer annealing")。新颖的PCR添加剂Q-Bond能够在45分钟内完成循环反应,而不影响表现(参见"Fast primer annealing")。

2x Rotor-Gene Probe PCR Kit*的组分
组分 特性 优势
HotStarTaq Plus DNA聚合酶 95ºC条件下5分钟激活 在室温下建立qPCR反应体系
Rotor-Gene Probe PCR Buffer NH4+和K+平衡组合预混液 特异性引物退火 ,确保可靠的qPCR结果
独特的Q-Bond添加剂 更快速的PCR循环,快速获得结果,一天可进行更多的反应
*包含dNTP混合液(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)。
Procedure
即用型Rotor-Gene Probe PCR Master Mix无需优化反应和循环条件。只需在预混液中添加模板cDNA、引物和探针,然后设置PCR仪即可开始实验。试剂盒中提供的操作手册有使用说明。

水解探针(如TaqMan探针)与Rotor-Gene Probe PCR Kit配合使用,在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上快速、灵敏的定量,只需将引物探针混合物和模板加入预混液即可。

为了两步法定量RT-PCR获得更加优化的结果,推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒只需20分钟即可快速合成cDNA,并可完全去除基因组DNA的污染。

Applications

Rotor-Gene Probe PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪,使用序列特异性探针采用定量两步法RT-PCR可快速定量cDNA靶分子。该试剂盒也与Rotor-Gene 3000和Rotor-Gene 6000兼容。

在Rotor-Gene PCR仪上使用Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit,可利用序列特异性探针对RNA靶分子进行超快速的一步法qRT-PCR基因表达分析。

Features
Specifications
应用 Real-time quantification of genomic DNA or cDNA targets
描述 For ultrafast quantitative real-time PCR and two-step RT-PCR using sequence-specific probes
反应类型 Real-time PCR and two-step RT-PCR
real-time或终点法PCR Real-time
样本/目标类型 DNA, cDNA
单一或多重 Single
SYBR Green I或序列特异性探针 Sequence-specific probes
热循环仪 Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
有/无ROX Without ROX dye

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产品介绍与指南 (1)
试剂盒操作手册 (1)
For fast real-time PCR, two-step RT-PCR, and one-step RT-PCR using sequence-specific probes on Rotor-gene cyclers.
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