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Rotor-Gene Multiplex PCR Kit

用于在Rotor-Gene PCR仪上超快速的两步法多重qRT-PCR基因表达分析

  • 在Rotor-Gene PCR仪上获得超快速、可靠的结果
  • 单管内灵敏检测多个靶序列
  • 表现优越的多重PCR,无需优化
  • 准确检测靶基因的微小差异

Rotor-Gene Multiplex PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和其他Rotor-Gene PCR仪,进行超快速、高度可靠的多重定量两步法RT-PCR,使用序列特异性探针。通过调整热循环仪,可在同一反应中同时定量分析多达4个cDNA靶基因(如1个对照基因和3个靶基因)。特殊优化的预混液配合独特的Rotor-Gene PCR仪,表现卓越。为方便使用,预混液可储存在2–8°C。

Cat No./ID: 204772
Rotor-Gene Multiplex PCR Kit (80)
Trial kit for 80 x 25 µl reactions: 1 ml 2x Rotor-Gene Multiplex PCR Master Mix, 2 ml RNase-Free Water
Cat No./ID: 204774
Rotor-Gene Multiplex PCR Kit (400)
For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x Rotor-Gene Multiplex PCR Master Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water

Rotor-Gene Multiplex PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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可靠的双重分析。
采用双重两步法real-time RT-PCR,配合Rotor-Gene Multiplex PCR Kit和自行设计的TaqMan探针在Rotor-Gene Q实时荧光定量PRC仪上检测[A] IL8(白细胞介素-8)和[B] ACTB(β-actin)。10倍稀释白细胞cDNA模板从100 ng到1 pg,PCR扩增效率高,大约为95%。[C] 获得的CT值与那些存档的在不同反应管中反应获得的CT值相当,由此表明该双重分析的可靠性。
1
可靠的多重分析。
用10倍稀释的人白细胞cDNA(10 ng到10 pg)作为模板进行4重real-time PCR。反应使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪和Rotor-Gene Multiplex PCR Kit或供应商S提供的仪器或试剂盒,重复进行三次反应。[A]相应探针扩增的靶基因和荧光颜色。[B]4个靶基因的CT值(供应商S提供的仪器和试剂盒不能检测IFNG;N.D.)。Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪上较低的CT值表明QIAGEN的产品有更高的灵敏度。[C]使用Rotor-Gene Multiplex PCR Kit的TNF扩增曲线。[D]使用供应商S试剂盒的TNF扩增曲线。[E]使用Rotor-Gene Multiplex PCR Kit的IFNG扩增曲线。[F]使用供应商S试剂盒的IFNG扩增曲线。
Performance
使用Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit,多达4个cDNA靶基因可在单管内同步快速定量分析,提高通量的同时,节约珍贵的样本(参见 "Reliable multiplex analysis" and "Reliable duplex analysis")。多重分析中不同表达水平的靶基因在同一个反应管中以同样的效率扩增,可确保可靠的相对定量分析。
Principle
扩增参照和靶基因在同一个反应管中,减少操作误差,提高了基因定量分析的可靠性。Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit确保在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行可靠的多重cDNA靶基因定量分析,无需优化反应和循环条件(参见"QIAGEN multiplex kits")。 平衡的K+和NH4+离子组合确保高度特异性,促进特异性引物退火,PCR特异性高、灵敏度好。一种新颖的PCR添加剂合成的Factor MP专用于多重PCR应用,能够以同样的效率扩增在同一反应中不同的扩增子(参见 "Unique PCR buffer")。

一种新颖的PCR添加剂Q-Bond可缩短扩增时间,确保快速扩增的同时不影响表现(参见"Fast primer annealing")。 此外,高度严谨的热启动酶HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95ºC条件下只需5分钟即可快速激活。

2x Rotor-Gene Multiplex PCR Kit*的组分
组分 特性 优势
HotStarTaq Plus DNA聚合酶 95ºC条件下5分钟激活 室温下建立qPCR反应体系
Rotor-Gene Multiplex PCR缓冲液 NH4+和K+平衡组合预混液 特异性引物退火,确保可靠的qPCR结果
合成的Factor MP 在同一反应管中可靠的进行多达4个基因的多重分析
独特的Q-Bond添加剂 更快速的PCR循环,快速获得结果,一天可进行更多的反应
*  包含dNTP混合液(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)。
Procedure

应用即用型预混液无需优化反应和循环条件。只需在预混液中添加模板cDNA和引物探针对,然后设置PCR仪即可开始实验。试剂盒中提供的操作手册中列出了推荐染料,并为多重qPCR分析提供了单独的实验方案。

为了两步法定量RT-PCR获得更加优化的结果,推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒只需20分钟即可快速合成cDNA,并可完全去除基因组DNA的污染。

Applications

Rotor-Gene Multiplex PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪,使用序列特异性探针进行快速的两步法RT-PCR分析。该试剂盒也与Rotor-Gene 3000和Rotor-Gene 6000兼容。多达4个cDNA靶基因可在单管内同步快速定量分析,提高通量的同时,节约珍贵的样本。

Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit用于Rotor-Gene PCR仪上,使用序列特异性探针对RNA靶分子进行超快速的一步法qRT-PCR多重分析。

Features
Specifications
应用 Real-time quantification of genomic DNA or cDNA targets in a multiplex format
描述 For ultrafast quantitative multiplex real-time PCR and two-step RT-PCR using sequence-specific probes
反应类型 Real-time PCR and two-step RT-PCR
real-time或终点法PCR Real-time
样本/目标类型 DNA, cDNA
单一或多重 Multiplex
SYBR Green I或序列特异性探针 Sequence-specific probes
热循环仪 Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
有/无ROX Without ROX dye

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产品介绍与指南 (1)
常见问题 (12)
试剂盒操作手册 (1)
For fast multiplex real-time PCR, two-step RT-PCR, and one-step RT-PCR using sequence-specific probes on Rotor-Gene cyclers
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