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QuantiFast SYBR® Green PCR Kit

使用SYBR Green I的快速两步法定量RT-PCR,适用于基因表达分析

  • 快速获得结果,可节省多达60%的时间
  • 可特异性检测低拷贝数的模板
  • 准确检测各种起始量的模板
  • 优化的即用型预混液用于快速PCR反应
  • 通用的操作流程适用于标准和快速PCR仪

QuantiFast SYBR Green PCR Kit应用SYBR Green I法两步法real-time RT-PCR,可对目标cDNA进行快速、特异性的定量检测。Q-Bond和优化的预混液可缩短real-time PCR反应时间,适用于标准或快速PCR仪。即用型预混液中的热启动酶和独特的PCR缓冲液可确保在所有real-time PCR仪上进行灵敏的qPCR,无需优化。为便于使用,预混液可保存在2–8°C。

Cat No./ID: 204057
QuantiFast SYBR Green PCR Kit (4000)
For 4000 x 25 µl reactions: 2 x 25 ml 2x QuantiFast SYBR Green PCR Master Mix (contains ROX dye), 20 ml RNase-Free Water

QuantiFast SYBR® Green PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
PCR反应时间极大缩短。
在标准PCR循环仪上使用QuantiFast SYBR® Green PCR Kit进行两步法real-time RT-PCR,可缩短PCR总运行时间达60% (进行40个PCR循环,无熔曲线分析;与标准的QIAGEN real-time PCR Kit相比较)。L:LightCycler 2.0;A1:ABI PRISM 7900;A2:Applied Biosystems 7500;A3:ABI PRISM 7000。
1
能够分辨拷贝数的细微差别。
在Mastercycler ep realplex上使用QuantiFast SYBR® Green PCR Kit检测男性供体基因组DNA中的Y染色体特异性的单拷贝基因SRY。[A] 可明显区分出1000至1.5拷贝的曲线。[B] 拷贝数 (log) 与CT值曲线显示了高线性度。
2
更快获得结果,且灵敏性高。
在Applied Biosystems 7500 Fast System上利用两步法real-time RT-PCR分析人白细胞中MYC (一种原癌基因) 的表达。使用10倍稀释的cDNA (10 ng至10 pg) 进行两次重复反应。[A] 在快速循环模式下使用QuantiFast Kit的CT值与 [B] 在标准循环模式下使用QuantiTect Kit的CT值相当。而使用Supplier AII的标准循环试剂盒,不仅是在 [C] 快速循环模式下,而且在 [D] 推荐的标准循环模式下,亦只能获得较差的CT值。
3
灵敏的两步法RT-PCR。
使用iCycler iQ和 [A] QuantiFast SYBR® Green PCR Kit或 [B] Supplier BV的试剂盒,分析人白细胞中MYC (一种原癌基因) 的表达。使用10倍稀释的cDNA (100 ng至0.1 ng) 进行两次重复反应。参照快速循环实验方案,使用Supplier BV的仪器专用试剂盒。QuantiFast Kit的CT值较低,说明灵敏度更高。
Performance

QuantiFast SYBR Green PCR Kits通过快速PCR反应,实现了特异性、灵敏的real-time PCR检测(参见"Sensitive two-step RT-PCR")。PCR反应时间缩短60%(参见"Significantly reduced PCR times"),是您更快获得结果,而不影响PCR效果(参见"Faster results without compromising sensitivity")。您也可以大幅度提高样本通量,或与其他用户高效的共用PCR仪。

QuantiFast SYBR Green PCR Kit可清楚区分模板量的细微差别。即使低拷贝数的模板只有细微差别,该试剂盒也能准确定量(参见"Resolution of small differences in copy number")。

Principle

QuantiFast SYBR Green PCR Kits可在大范围内进行特异性、灵敏的检测,适用于标准和快速PCR仪。预混液中的SYBR Green I染料可分析多个目标核酸,无需合成序列特异性探针。特制的快速PCR缓冲液包含新型Q-Bond成分,可大大缩短变性、退火和延伸时间(参见"Fast primer annealing")。PCR缓冲液中平衡的K+和NH4+离子的配比可促进特异性的引物退火,确保高度灵敏和特异的PCR反应(参见"Specific primer annealing")。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase必须要在95°C加热5分钟才能活化,需要严格的热启动,可避免生成非特异性产物。

2x QuantiFast SYBR Green PCR Kit的成分*
成分 特点 优势
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 95ºC加热5分钟活化 在室温进行qPCR反应体系构建
QuantiFast SYBR Green PCR Buffer 平衡的NH4+和K+离子配比 引物探针的特异性结合确保获得可靠结果
独特的Q-Bond添加剂 PCR运行时间缩短,更快获得结果,一天内可完成更多PCR反应
SYBR Green I染料 与DNA双链结合时产生强荧光信号 高灵敏度扩增
ROX染料 对Applied Biosystems和Agilent PCR仪进行荧光信号的校准 对需要ROX染料的PCR仪进行校准,不影响PCR反应结果
* 也含有dNTP混合液(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)。

Procedure

QuantiFast SYBR Green PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应和扩增条件进行优化。只需在即用型PCR预混液中加入引物和cDNA模板,即可开始反应。按照操作手册中的操作流程,即可快速获得可靠的结果,适用于各种real-time PCR仪。

为获得最佳的两步法real-time RT-PCR结果,我们建议使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒可在20分钟进行快速cDNA合成,并去除基因组DNA污染。

我们推荐适用QuantiTect Primer Assays进行SYBR Green法的基因表达分析。 QuantiTect Primer Assays是经生物信息学验证的引物,适用于人类、大鼠、小鼠和其他多个物种的全基因组。可直接在GeneGlobe订购该产品。

Applications

QuantiFast SYBR Green PCR Kits可用于cDNA的基因表达分析,适用于各种real-time PCR仪,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的PCR仪。Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪或其他Rotor-Gene PCR仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit。

Features
Specifications
应用 SYBR Green-based, real-time PCR, two-step RT-PCR
反应类型 Real-time and two-step RT-PCR
real-time或终点法PCR Real-time
样本/目标类型 cDNA, DNA
单一或多重 Single
SYBR Green I或序列特异性探针 SYBR Green I
热循环仪 Applied Biosystems, Bio-Rad, Cepheid, QIAGEN, Eppendorf, Roche, and Agilent
有/无ROX With ROX
有/无热启动酶 With hotstart

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