QuantiFast SYBR® Green PCR Kit使用SYBR Green I的快速两步法定量RT-PCR,适用于基因表达分析
QuantiFast SYBR Green PCR Kit应用SYBR Green I法两步法real-time RT-PCR,可对目标cDNA进行快速、特异性的定量检测。Q-Bond和优化的预混液可缩短real-time PCR反应时间,适用于标准或快速PCR仪。即用型预混液中的热启动酶和独特的PCR缓冲液可确保在所有real-time PCR仪上进行灵敏的qPCR,无需优化。为便于使用,预混液可保存在2–8°C。
QuantiFast SYBR® Green PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。
Performance
QuantiFast SYBR Green PCR Kits通过快速PCR反应,实现了特异性、灵敏的real-time PCR检测(参见"Sensitive two-step RT-PCR")。PCR反应时间缩短60%(参见"Significantly reduced PCR times"),是您更快获得结果,而不影响PCR效果(参见"Faster results without compromising sensitivity")。您也可以大幅度提高样本通量,或与其他用户高效的共用PCR仪。 QuantiFast SYBR Green PCR Kit可清楚区分模板量的细微差别。即使低拷贝数的模板只有细微差别,该试剂盒也能准确定量(参见"Resolution of small differences in copy number")。
Principle
QuantiFast SYBR Green PCR Kits可在大范围内进行特异性、灵敏的检测,适用于标准和快速PCR仪。预混液中的SYBR Green I染料可分析多个目标核酸,无需合成序列特异性探针。特制的快速PCR缓冲液包含新型Q-Bond成分,可大大缩短变性、退火和延伸时间(参见"Fast primer annealing")。PCR缓冲液中平衡的K+和NH4+离子的配比可促进特异性的引物退火,确保高度灵敏和特异的PCR反应(参见"Specific primer annealing")。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase必须要在95°C加热5分钟才能活化,需要严格的热启动,可避免生成非特异性产物。
Procedure
QuantiFast SYBR Green PCR Kit含有即用型预混液,无需对反应和扩增条件进行优化。只需在即用型PCR预混液中加入引物和cDNA模板,即可开始反应。按照操作手册中的操作流程,即可快速获得可靠的结果,适用于各种real-time PCR仪。 为获得最佳的两步法real-time RT-PCR结果,我们建议使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒可在20分钟进行快速cDNA合成,并去除基因组DNA污染。 我们推荐适用QuantiTect Primer Assays进行SYBR Green法的基因表达分析。 QuantiTect Primer Assays是经生物信息学验证的引物,适用于人类、大鼠、小鼠和其他多个物种的全基因组。可直接在GeneGlobe订购该产品。
Applications
QuantiFast SYBR Green PCR Kits可用于cDNA的基因表达分析,适用于各种real-time PCR仪,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的PCR仪。Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪或其他Rotor-Gene PCR仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene SYBR Green PCR Kit。
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