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miScript PCR Starter Kit

用于设置和优化miRNA定量实验

  • 便利的设置miRNA定量实验
  • 易于监控、优化miRNA定量实验
  • 可靠的阳性参照和标准化参照

miScript PCR Starter Kit适合于miRNA研究领域的研究人员,提供所有miRNA定量分析需要的成分。该试剂盒包含逆转录反应和real-time PCR所需的试剂、用于标准化的RNU6-2 的miScript PCR Control和检测人类miR-15a的miScript Primer Assay。

Cat No./ID: 218193
miScript PCR Starter Kit (80)
For 10 x 20 μl RT reactions and 80 x 25 μl PCRs; miScript Reverse Transcriptase Mix, 10x miScript Nucleics Mix, 5x miScript HiSpec Buffer, 5x miScript HiFlex Buffer, 2x QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix, 10x miScript Universal Primer, Human RNU6B (RNU6-2) miScript Primer Assay, Human miR-15a miScript Primer Assay, RNase-Free Water

miScript PCR Starter Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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准确检测miR-15a,符合线性规律。
从HeLa S3细胞中纯化RNA。使用miScript PCR Starter Kit生成cDNA,并使用不同量的cDNA(10 pg至10 ng),通过real-time PCR检测miR-15a。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行real-time PCR。随着cDNA量的增加,获得的CT值呈线性下降,证明了不同的模板量的定量检测。
Performance

miR-15a可在人类组织和细胞中高表达,是阳性对照的理想选择。miScript PCR Starter Kit在阳性对照实验中能够准确、线性检测miR-15a,用于设置和优化miRNA定量实验(参见"Accurate, linear detection of miR-15a")。

Principle

miScript PCR System配合SYBR® Green-based real-time PCR,简单的进行miRNA定量和分析。miScript PCR System可以完成从RNA中合成cDNA和使用SYBR® Green法real-time PCR检测miRNAs涉及的所有步骤。miScript PCR Starter Kit配合以单个试剂盒形式提供的miScript PCR System的重要组件,在研究者定量目的miRNA之前进行miR-15a定量和结果的标准化。

Procedure

使用miScript HiSpec Buffer或miScript HiFlex Buffer进行逆转录反应得到的cDNA,作为real-time PCR模板。使用人类miR-15a-specific miScript Primer Assay(正向引物)和miScript Universal Primer(反向引物)配合QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix进行Real-time PCR。如需标准化,使用人类RNU6-2 (RNU6B) miScript Primer Assay和miScript Universal Primer配合QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix同时进行反应即可。

Applications
  • 设置miRNA定量实验
  • miRNA对照实验

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试剂盒操作手册 (1)
For real-time PCR analysis of microRNA using SYBR Green detection
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