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QuantiNova SYBR Green PCR Kit

通过基于SYBR Green的qPCR获得无与伦比的优异结果
  • 通过新型热启动机制获得无与伦比的特异性
  • 通过内置颜色指示剂实现准确的反应构建
  • 精确、灵敏的检测低至单拷贝的靶序列
  • 采用超快速PCR技术,提高样本通量和反应速度
  • 与QuantiTect Primer Assay实现无缝对接
QuantiNova SYBR Green PCR Kit具有更高特异性、敏感度、反应速度和处理安全性,为SYBR Green-based qPCR技术树立了全新标准。创新的热启动技术显著增加了real-time PCR特异性,通过使用优化的试剂,能够在任何real-time PCR仪上从cDNA或gDNA——甚至是数量低至1个拷贝的靶标——获得精确的定量检测结果。此外,内置的颜色指示剂帮助确保加样的准确性。
Cat No./ID: 208052
QuantiNova SYBR Green PCR Kit (100)
For 100 x 20 µl reactions: 1 ml 2x QuantiNova SYBR Green PCR Master Mix, 500 µl QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer, 250 µl QN ROX Reference Dye, 1.9 ml Water
Cat No./ID: 208054
QuantiNova SYBR Green PCR Kit (500)
For 500 x 20 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x QuantiNova SYBR Green PCR Master Mix, 500 µl QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer, 1 ml QN ROX Reference Dye, 1.9 ml Water
Cat No./ID: 208056
QuantiNova SYBR Green PCR Kit (2500)
For 2500 x 20 µl reactions: 15 x 1.7 ml 2x QuantiNova SYBR Green PCR Master Mix, 5 x 500 µl QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer, 5 X 1 ml QN ROX Reference Dye, 5 x 1.9 ml Water

QuantiNova SYBR Green PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer的出色实验表现。
使用QuantiTect Primer Assay和QuantiNova SYBR Green PCR Kit从Hela cDNA中扩增EGFR。使用QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer或Tris缓冲液将模板DNA从10 ng稀释至0.01 ng,反应在[A] Bio-Rad的CFX96与[B] Applied Biosystems的ViiA 7设备上进行。两种缓冲体系中所获得的CT值基本一致。所有都反应都重复三次。
1
QuantiNova SYBR Green PCR Kit适用平台灵活,且性能卓越。
使用Bio-Rad公司的CFX96、Applied Biosystems的ViiA 7和Applied Biosystems的StepOnePlus循环仪,从Hela cDNA中扩增EGFR、ERBB2和MYC基因。使用Tris缓冲液或QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer稀释模板DNA。无论使用何种PCR仪、循环条件或稀释缓冲液,QuantiNova SYBR Green PCR Kit均生成了一致的高质量结果。
2
灵敏准确的检测单拷贝基因。
[A] 使用QuantiNova SYBR Green PCR Kit,分别以30、3、0.3和0.03 ng样本量(10000-10个靶标拷贝数)检测白细胞基因组DNA中的单拷贝IL1R2基因,从而制作针对不同靶标拷贝数的CT值校准曲线。(所得结果)呈现了高度的线性相关性。随后在60个反应中使用该校准曲线确定真实的靶标拷贝数,这些预混液中理论上仅含有单个拷贝的靶标。[B] 使用泊松方程计算每一反应中(靶标)拷贝的理论期望值,并与使用校准曲线确定的真实拷贝数值进行比较。计算和实验所获的检出频率之间存在高度的一致性,证明了本方法的强大能力及高度灵敏性。
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在宽泛的动态范围内可准确定量。
在Applied Biosystems的ViiA 7设备和Bio-Rad的CFX96设备上使用一个针对β-肌动蛋白的实验室研发检测试剂,对100ng至10fg浓度区间的Hela cDNA十倍稀释样本进行定量。[A]QuantiNova SYBR Green PCR Kit在宽达8个数量级的动态区间内获得了准确结果。[B]在两种设备平台上均使用可类比的扩增绘图对这一动态范围进行了确证。
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在多种real-time PCR上都有可靠、灵敏的表现。
在多种循环仪上对Hela细胞中的EGFR进行了分析,从而充分研究了每一检测平台的快速循环反应能力。无论使用何种检测平台、循环条件,及是否需要阴性染料,QuantiNova SYBR Green PCR Kit在所有的测试平台上均提供了稳定的灵敏度、可重复性和高效性。
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与同类SYBR Green PCR试剂盒的性能对比。
[A]在Bio-Rad的CFX96设备上将供应商B所提供的SYBR Green PCR试剂盒或[B]在Applied Biosystems的ViiA 7循环仪上将供应商L所提供的SYBR Green PCR试剂盒与QuantiNova SYBR Green PCR Kit的反应性能进行比较。使用QuantiNova SYBR Green PCR Kit明确获得了更低的CT值、更好的重复性和更高的反应效率。
Performance
精确、灵敏的进行单DNA分子检测

QuantiNova SYBR Green PCR Kit具有高灵敏度,即便是对数量低至单个拷贝的靶标,亦能准确、可靠的检测(参见Robust and sensitive detection of single-copy targets)。即便在超快速的循环条件下,QuantiNova SYBR Green PCR Kit也能实现出色的灵敏度。

QuantiNova SYBR Green PCR Kit适用的模板用量线性范围广。其卓越性能横跨8个数量级模板(从100 ng到100 fg的cDNA),无论使用何种设备,均可获得准确、可靠的定量检测结果(参见Accurate quantification over a wide dynamic range)。

多种real-time PCR仪均可获得高度一致的结果

QuantiNova试剂严谨的特异性和卓越的灵敏度能够在QIAGEN Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上获得出色结果,同时也兼容任何real-time PCR仪——无论它们是何种形式的设备,是否兼容快速循环,以及是否需要阴性参比染料。如有需要,只需将QuantiNova SYBR Green PCR Kit中所附带的ROX染料加入反应预混液即可。使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪、Agilent Technologies的Mx3005P、Applied Biosystems的7900 HT Fast、ViiA 7、StepOnePlus和7500 Fast、Roche的LightCycler 480、以及Bio-Rad的CFX96均能实现高度灵敏的扩增和定量结果(参见Consistent and sensitive results with a range of real-time PCR cyclers)。

同类SYBR Green PCR试剂盒难以匹敌的性能

相对于其他SYBR Green PCR试剂盒,QuantiNova SYBR Green PCR Kit能够获得更为优异的反应结果(参见Superior results compared to similar SYBR Green PCR kits)。无论使用何种循环条件或反应设备,QuantiNova技术均能生成更低的CT值,实现更好的可重复性和更高的反应效率。

内置的颜色指示剂,有助于准确建立反应体系

QuantiNova Probe PCR Kit中的预混液含有蓝色惰性染料,不会干扰real-time PCR,但会使反应液在管中或孔板中便于观察。QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer含有黄色惰性染料。当稀释在QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer中的模板核酸被加入预混液时,溶液颜色由蓝色变为绿色(参见Accurate reaction setup indicated by the built-in pipetting control),便于观察移液和反应体系构建是否正确。

在构建反应期间,QuantiNova Yellow Template Dilute Buffer可让您高枕无忧,使用QuantiNova SYBR Green PCR Kit时,不必采用QuantiNova Yellow Template Dilute Buffer也能获得出色结果(参见Maximum performance with and without QuantiNova Yellow Template Dilution Buffer)。QuantiNova技术设计十分灵活,可整合入任何现有工作流程中。因此,无论对何种扩增靶标、设备和稀释缓冲液,都能实现卓越性能(参见Superior and flexible performance of QuantiNova SYBR Green PCR Kit)。

Principle
QuantiNova Probe PCR Kit采用新型的抗体介导的热启动技术,可对cDNA或gDNA进行高度特异性分析(参见Principle of the novel QuantiNova hot-start mechanism)。在温度较低时,QuantiNova DNA Polymerase在QuantiNova Antibody和新型添加剂QuantiNova Guard的作用下,处于非活性状态。严格的热启动机制能够防止非特异性退火引物的延伸,并防止生成引物二聚体。将温度升至95°C,两分钟后,QuantiNova Antibody和QuantiNova Guard发生变性,QuantiNova DNA Polymerase被激活,开始PCR扩增反应。

此外,QuantiNova技术能够简化您的工作流程,同时维持PCR的灵敏度和高效性。预混液及QuantiNova Yellow Dilution Buffer中的惰性染料能够作为颜色指示剂,确保每个反应体系正确构建。预混液的蓝色能够增加反应管中体系的可视性,在QuantiNova Yellow Dilution Buffer中加入核酸模板进行稀释的过程中(该蓝色指示剂)还会转变为绿色。QuantiNova SYBR Green PCR Kit中PCR缓冲体系的独特配方显著提升了热启动反应的严谨性并减少了循环步骤,使您的PCR反应以更迅速地完成,进而提高通量。
Procedure
含有即用型预混液,因此无需优化反应和循环条件。只需将gDNA或cDNA模板、引物和探针加入预混液,按照试剂盒使用手册中的实验方案进行反应,就可在任何real-time PCR仪上快速获得可靠结果。ROX参比染料在单管中另外提供,染料浓度可依据PCR仪种类进行调节,因此QuantiNova SYBR Green PCR Kit几乎可用于所有real-timePCR仪,不受仪器类型或循环条件限制。
Applications
QuantiNova SYBR Green PCR Kit可用于基于SYBR Green的cDNA基因表达分析和定量gDNA分析,适用于所有类型的real-time PCR仪,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的PCR仪,当然也适用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪。

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快速启动实验方案 (1)
For highly sensitive and specific real-time qPCR and two-step RT-PCR using SYBR Green
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试剂盒操作手册 (1)
For highly sensitive, ultrafast, quantitative real-time PCR and two-step RT-PCR using SYBR Green
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