text.skipToContent text.skipToNavigation

QuantiTect SYBR® Green RT-PCR Kit

使用SYBR Green I进行一步法定量RT-PCR,用于基因表达分析

  • 一步法RT-PCR具有高特异性
  • 可靠定量检测低丰度转录本
  • 准确定量检测各种起始量样本
  • 无需优化反应和循环条件

QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit使用SYBR Green I通过一步法real-time RT-PCR对RNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和独特的实时定量PCR缓冲液确保了对RNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit还含有优化的RT混合液,可对多种起始量的模板RNA进行高效、灵敏的逆转录。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

Cat No./ID: 204243
QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit (200)
For 200 x 50 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x QuantiTect SYBR Green RT-PCR Master Mix, 100 µl QuantiTect RT Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water
Cat No./ID: 204245
QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit (1000)
For 1000 x 50 µl reactions: 25 ml 2x QuantiTect SYBR Green RT-PCR Master Mix, 0.5 ml QuantiTect RT Mix, 20 ml RNase-Free Water

QuantiTect SYBR® Green RT-PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
一步法RT-PCR。
QuantiTect SYBR® Green RT-PCR Kit避免了繁琐且耗时的反应条件优化过程。只需将引物和模板加入即用型RT-PCR预混液,在任意一台real-time循环仪上开始反应即可。
2
一步法RT-PCR可与两步法RT-PCR相媲美。
使用针对人MAPK14的QuantiTect Primer Assay和指定的试剂盒分析HeLa细胞总RNA(10 ng至100 pg)或相同量的cDNA。一步法和两步法RT-PCR的CT值相当。
Performance
QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit含有独特的逆转录酶,可高效、灵敏的进行cDNA合成在宽泛的范围内符合线性规律(参见"Comparable results in one-step and two-step RT-PCR")。HotStarTaq DNA Polymerase提供严格的热启动,进一步提高了PCR反应的特异性(参见"Highly specific amplification")。
Principle

QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kits含有优化的即用型预混液,可使用SYBR Green I对RNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。预混液中的荧光染料SYBR Green I可对很多不同的靶序列进行分析,无需合成靶标特异性标记引物。独特的PCR缓冲液含有K+和NH4+离子,能促使特异性引物退火,获得高RT-PCR特异性和灵敏度(参见"Specific primer annealing")。此外,HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect SYBR Green RT-PCR预混液含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,保证之前反应残留的PCR产物不会影响后续的PCR反应。

2x QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit的组分
组分 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 95ºC孵育15分钟即可活化 室温下即可构建qPCR反应体系
QuantiTect SYBR Green RT-PCR Buffer NH4+和K+的平衡组合 特异性引物退火确保PCR结果可靠
dNTP mix 含有dUTP,会部分替代dTTP,可进行UNG处理 可选择进行UNG处理,以消除残余PCR产物的污染物
SYBR Green I染料 DNA双链结合时,生成强烈的荧光信号 高度灵敏的定量检测
ROX染料 在Applied Biosystems或Agilent的PCR仪上进行荧光信号校准 可在需要ROX染料的PCR仪上进行准确的定量检测。不会干扰real-time PCR反应
Omniscript和Sensiscript Reverse Transcriptases 对RNA具有高亲和性的酶 进行RNA逆转录,包括复杂二级结构的逆转录
Procedure

QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物和模板加入到即用型RT-PCR预混液中,即可开始反应(参见"One-step RT-PCR")。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kits配合QuantiTect Primer Assays可在基因表达分析中获得高度特异性的结果。基因组范围、生物信息学验证的引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe网站上方便地订购。

Applications

QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit可用在各种real-time PCR仪上对cDNA目标序列进行基因表达分析,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的仪器。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上使用时,我们推荐专门为快速PCR研发的Rotor-Gene SYBR Green RT-PCR Kit。

Features
Specifications
应用 Real-time quantification of RNA targets
反应类型 Real-time and one-step RT-PCR
real-time或终点法PCR Real-time
样本/目标类型 RNA
单一或多重 Single
SYBR Green I或序列特异性探针 SYBR Green I
热循环仪 All real-time cyclers (e.g. LC, RG, ABI)
有/无ROX With ROX

您无权限查看此资源

常见问题 (33)
FAQ ID -1056
浏览
FAQ ID -1083
浏览
FAQ ID -1084
浏览
FAQ ID -1085
浏览
FAQ ID -1086
浏览
FAQ ID -1141
浏览
FAQ ID -1143
浏览
FAQ ID -1146
浏览
FAQ ID -1438
浏览
FAQ ID -1441
浏览
FAQ ID -1446
浏览
FAQ ID -1447
浏览
FAQ ID -1451
浏览
FAQ ID -1714
浏览
FAQ ID -1982
浏览
FAQ ID -283
浏览
FAQ ID -2134
浏览
FAQ ID -2135
浏览
FAQ ID -2371
浏览
FAQ ID -2654
浏览
FAQ ID -2655
浏览
FAQ ID -2682
浏览
FAQ ID -312
浏览
FAQ ID -328
浏览
-20
浏览
FAQ ID -539
浏览
FAQ ID -551
浏览
FAQ ID -553
浏览
FAQ ID -564
浏览
FAQ ID -729
浏览
FAQ ID-751
浏览
FAQ ID -849
浏览
FAQ ID -850
浏览
试剂盒操作手册 (2)
For genomewide, ready-to-use real-time RT-PCR assays using SYBR Green detection
显示更多
For quantitative, real-time one-step RT-PCR using SYBR Green I
显示更多
fragment fix placeholder