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QuantiFast Probe RT-PCR Kits

使用序列特异性探针进行一步法快速RT-PCR,用于基因表达分析

  • 快速获得结果,节约多达60%的时间
  • 灵敏的检测低拷贝数模板
  • 准确检测各种起始量的模板
  • 优化的即用型预混液用于快速PCR反应
  • 通用的操作流程适用于标准和快速PCR仪

QuantiFast Probe RT-PCR Kits利用序列特异性探针,可对RNA进行快速、灵敏的两步法RT-PCR定量检测。Q-bond技术和优化的预混液使real-time RT-PCR的运行时间缩短,不仅在快速PCR仪上,即使在普通PCR仪上也可快速完成反应。即用型预混液含有热启动酶和独特的PCR缓冲液,确保在任何real-time PCR仪上无需优化即可进行灵敏的定量PCR检测。该试剂盒也提供经优化的RT混合液,10分钟即可高效合成cDNA。提供两种试剂盒规格。对于需要ROX进行荧光校准的PCR仪,可选择QuantiFast Probe RT-PCR Kit。对于其他PCR仪,可选择QuantiFast Probe RT-PCR +ROX Vial Kit。为了便于使用,预混液可保存在2–8°C。

Cat No./ID: 204454
QuantiFast Probe RT-PCR Kit (400)
For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x QuantiFast Probe RT-PCR Master Mix (contains ROX dye), 100 µl QuantiFast RT Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water
Cat No./ID: 204456
QuantiFast Probe RT-PCR Kit (2000)
For 2000 x 25 µl reactions: 25 ml 2x QuantiFast Probe RT-PCR Master Mix (contains ROX dye), 0.5 ml QuantiFast RT Mix, 20 ml RNase-Free Water
Cat No./ID: 204554
QuantiFast Probe RT-PCR +ROX Vial Kit (400)
For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x QuantiFast Probe RT-PCR Master Mix (without ROX dye), 210 µl ROX Dye Solution, 100 µl QuantiFast RT Mix, 2 ml RNase-Free Water
Cat No./ID: 204556
QuantiFast Probe RT-PCR +ROX Vial Kit (2000)
For 2000 x 25 µl reactions: 25 ml 2x QuantiFast Probe RT-PCR Master Mix (without ROX dye), 1.05 ml ROX Dye Solution, 0.5 ml QuantiFast RT Mix, 20 ml RNase-Free Water

QuantiFast Probe RT-PCR Kits适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
RT-PCR反应时间明显缩短。
在标准PCR循环仪上使用QuantiFast Probe Kit进行一步法real-time RT-PCR,可缩短RT-PCR总运行时间达60% (进行40个PCR循环;与标准的QIAGEN real-time PCR Kit相比较)。L:LightCycler 2.0;A1:ABI PRISM 7900;A2:Applied Biosystems 7500;A3:ABI PRISM 7000。
1
灵敏的一步法RT-PCR。
在Applied Biosystems 7500 Fast System上使用10倍稀释的人白细胞RNA (100 ng至0.1 ng) 和采用Primer Express设计的针对IL12RBI (一种I型跨膜蛋白) 的TaqMan Assay进行两次重复反应。[A] QuantiFast Kit的灵敏度高于 [B] Supplier I的试剂盒 (参照标准循环实验方案使用),具有更低的CT值,可实现低至0.1 ng RNA的转录本定量。
2
动态范围宽。
使用Primer Express设计的TaqMan Assay对人白细胞中的泛素表达进行分析。在ABI PRISM 7900上进行双重两步法和一步法qPCR反应。[A] 使用QuantiFast Probe PCR Kit分析10倍稀释的cDNA (100 ng至10 pg)。[B] 使用QuantiFast Probe RT-PCR Kit分析10倍稀释的RNA (100 ng至10 pg)。
4
动态范围宽,灵敏度高。
使用10倍稀释的人白细胞RNA和针对β-actin的TaqMan Assay重复三次反应。QuantiFast Probe RT-PCR Kit提供了100 ng至1 pg RNA模板范围的准确基因表达分析。
Performance

使用QuantiFast Probe RT-PCR Kits可获得灵敏的结果,比其他real-time RT-PCR试剂盒的性能更加优越(参见"Sensitive One-step RT-PCR")。可节约多达60%的PCR运行时间(参见"Significantly reduced PCR times"),可确保更快获得结果,而RT-PCR的效果不会受到影响(参见"Faster results without compromising sensitivity")。使您可以极大提高样本通量,或通过与其他人员共享PCR仪提高效率。使用QuantiFast Probe RT-PCR Kits不会改变您的操作流程,并适用于标准或快速PCR仪。

QuantiFast Probe RT-PCR Kits可在大范围内进行精确定量检测(参见"Comparable dynamic range")。可靠检测稀释倍数高达6个数量级的模板稀释液(参见"Wide dynamic range and high sensitivity")。

Principle

QuantiFast Probe RT-PCR Kits可在大范围内进行快速、灵敏的定量检测,适用于标准和快速PCR仪。该试剂盒专为各种序列特异性探针设计,包括水解探针(TaqMan探针和其他双标记探针)和FRET探针。经优化的QuantiFast RT Mix可确保在10分钟内合成cDNA。特制的快速RT-PCR缓冲液包含新型Q-Bond成分,可大大缩短变性、退火和延伸时间(参见"Fast primer annealing")。RT-PCR缓冲液中K+和NH4+离子的平衡配比可促进特异性的引物退火,确保高度灵敏和特异的RT-PCR反应(参见"Specific primer annealing")。此外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase必须要在95°C加热5分钟才能活化,需要严格的热启动,可避免生成非特异性产物。  

2x QuantiFast Probe RT-PCR Kit的成分*
成分 特点 优势
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 95ºC加热5分钟活化 在室温进行qPCR反应体系构建
QuantiFast Probe RT-PCR Buffer 平衡的NH4+和K+离子配比 引物探针的特异性结合确保获得可靠结果
独特的Q-Bond添加剂 PCR运行时间缩短,更快获得结果,一天内可完成更多PCR反应
ROX染料 对Applied Biosystems和Agilent PCR仪进行荧光信号的校准 对需要ROX染料的PCR仪进行校准,不影响PCR反应结果
QuantiFast RT Mix 单独的溶液,需要在反应体系构建时另外加入 在10分钟内快速完成cDNA合成
* 也含有dNTP混合液(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)。 ROX染料或者在预混液中,或者另外提供。
Procedure

QuantiFast Probe RT-PCR Kits包含即用型预混液,无需对反应和扩增条件进行优化。只需按照操作手册进行实验,即可快速获得可靠的结果。提供含有和不含ROX染料的预混液(参见下表)。由于ROX浓度经优化,即使是低拷贝数也可通过数据自动分析进行检测。

选择合适的QuantiFast Probe RT-PCR Kit
ROX染料试剂盒 适用的PCR仪
混合在预混液中 QuantiFast Probe RT-PCR Kit 除Applied Biosystems 7500外的所有Applied Biosystems仪器
单独装在管中 QuantiFast Probe RT-PCR +ROX Vial Kit Applied Biosystems 7500、
Mx3000P、Mx3005P、Mx4000和Bio-Rad、Cepheid、Corbett、Eppendorf、和Roche的PCR仪
Applications

QuantiFast Probe RT-PCR Kits利用序列特异性探针,可在任何real-time PCR仪上对目标RNA进行基因表达分析,适用于Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid、Eppendorf、Roche和Agilent的PCR仪。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪或其他Rotor-Gene PCR仪上使用时,我们推荐使用专为快速PCR研发的Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit。

Features
Specifications
应用 Probe-based, real-time RT-PCR
反应类型 Real-time one-step RT-PCR
real-time或终点法PCR Real-time
样本/目标类型 RNA
单一或多重 Single
SYBR Green I或序列特异性探针 Sequence-specific probes
热循环仪 All real-time cyclers (e.g. LC, RG, ABI)
有/无ROX Available with ROX in master mix and with ROX as a separate vial

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