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FastLane Cell SYBR® Green Kit

采用SYBR Green法直接对细胞进行一步法real-time RT-PCR,无需RNA纯化

  • 无需纯化RNA,显著节省时间
  • 从细胞到real-time RT-PCR结果只需3个步骤
  • 可对96孔板或384孔板进行高通量分析
  • 独特的gDNA Wipeout Buffer实现只检测RNA
  • 优化的试剂和实验方案可立即开始实验
FastLane Cell SYBR Green Kit加快并简化real-time RT-PCR,适用于需要高通量基因表达分析的实验。该试剂盒提供一系列缓冲液用于从培养细胞制备FastLane裂解液。除了用于裂解细胞,缓冲液也可稳定细胞RNA并去除基因组DNA。FastLane裂解液可直接用于基于SYBR Green的一步法real-time RT-PCR。另有多种检测方式可供选择:应用序列特异性探针的检测或应用序列特异性探针的多重检测(含有或不含ROX阴性对照染料)。
Cat No./ID: 216213
FastLane Cell SYBR Green Kit (200)
FastLane Cell One-Step Buffer Set, 2x QuantiTect SYBR Green RT-PCR Master Mix, and QuantiTect RT Mix

FastLane Cell SYBR® Green Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
灵敏的检测,无需进行RNA纯化。
利用一步法real-time RT-PCR,对两种低丰度转录本INPP5D(一种磷酸酶)和SRF(血清应答因子)进行定量。FastLane Kit获得的CT值与使用RNeasy Mini Kit和QuantiTect SYBR® Green RT-PCR Kit的CT值相当。
1
可靠检测多种转录本。
使用FastLane Kit,分析包含A549细胞的384孔板中Eg5、GAPDH、HMBS和Rab5的表达水平。数据显示了三个重复孔的平均CT值及标准差。(数据由德国Cenix BioScience GmbH的Anne Grabner提供。)
2
高度特异性的定量检测。
使用FastLane Kit及针对INPP5D(一种磷酸酶)的QuantiTect Primer Assay进行一步法real-time RT-PCR,可在HeLa、HepG2和Cos细胞中实现特定的转录本定量检测,在熔解曲线分析图上显示为单峰。
3
对96孔板进行可重复性分析。
使用FastLane Kit及针对INPP5D(一种磷酸酶)的QuantiTect Primer Assay进行一步法real-time RT-PCR,包含HeLa ACC细胞的96孔板获得可重复的CT值。
Performance
FastLane Cell SYBR Green Kit应用独特的RT-PCR缓冲液,有效避免非特异性产物或引物二聚体的形成,可进行高度特异性的一步法real-time RT-PCR定量分析(参见"Highly specific quantification")。即使没有RNA纯化过程也可进行灵敏的定量分析(参见"Sensitive detection without RNA purification")。高通量实验的结果具有高度可重复性(参见"Highly reproducible analysis of a 96-well plate"和"Reliable detection of various transcripts"),且不会被基因组DNA污染影响。
Principle

FastLane Cell SYBR Green Kit应用FastLane技术,直接通过培养细胞制备细胞裂解液,用于一步法real-time RT-PCR。该试剂盒无需纯化RNA,因此加快并简化了培养细胞的real-time PCR分析,为高通量分析提供高度可重复的结果,使得对96或384孔板的操作更易于进行。

该试剂盒配合QuantiTect Primer Assays使用,可确保特异性转录产物的检测,这些引物是预设的全基因组引物系列,可在GeneGlobe上查看。

Procedure

使用FastLane Cell SYBR Green Kit,12分钟内通过3步即可获得裂解液:细胞洗涤、细胞裂解并稳定RNA、去除基因组DNA以及预制裂解液。预制的裂解液可直接用于一步法real-time RT-PCR。

该试剂盒提供足量试剂用于96孔板培养细胞的裂解以及后续的real-time RT-PCR(50 µl PCR体积),并可用于分析PCR体积为20 µl的单个384孔细胞培养板,如所需PCR体积为50 µl,需另购额外的QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit(200)。

Applications

FastLane Cell SYBR Green Kit是进行快速、高通量基因表达分析的理想工具,例如:

  • 验证siRNA介导的基因沉默效果
  • 药物筛查
  • 基因调控检测
Features
Specifications
应用 SYBR Green-based, real-time, one-step RT-PCR
酶活 Primer annealing
预混液 Yes
反应类型 One-step, cell lysis, RNA stabilization, DNA digestion
real-time或终点法PCR Real time
样本/目标类型 Cultured cells
单一或多重 Single
有/无热启动酶 Without hotstart