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FastLane Cell Probe Kit

采用探针法直接对培养细胞进行一步法real-time RT-PCR分析,无需纯化RNA

  • 无需纯化RNA,显著节省时间
  • 从细胞到real-time RT-PCR结果只需3个步骤
  • 可对96孔板或384孔板进行高通量分析
  • 独特的gDNA Wipeout Buffer实现只检测RNA
  • 优化的试剂和实验方案可立即开始实验
FastLane Cell Probe Kits加快并简化real-time RT-PCR,适用于需要高通量基因表达分析的实验。该试剂盒提供一系列缓冲液用于从培养细胞制备FastLane裂解液。除了用于裂解细胞,缓冲液也可稳定细胞RNA并去除基因组DNA。FastLane裂解液可直接用于多重一步法real-time RT-PCR。另有多种检测方式可供选择:应用SYBR Green检测或序列特异性探针检测(含有或不含ROX阴性对照染料)。
Cat No./ID: 216413
FastLane Cell Probe Kit (200)
FastLane Cell One-Step Buffer Set, 2x QuantiTect Probe RT-PCR Master Mix, and QuantiTect RT Mix

FastLane Cell Probe Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
灵敏的探针法检测,无需进行RNA纯化。
利用一步法real-time RT-PCR分析β-actin(细胞骨架蛋白)的表达。使用FastLane Kit获得的CT值与使用RNeasy Mini Kit和QuantiTect Probe RT-PCR Kit的CT值相当。
1
具有出色的灵敏性。
与其他供应商的同类试剂盒相比,使用FastLane Kit进行一步法real-time RT-PCR获得的CT值更低。各试剂盒与针对PPIA的试剂(一种异构酶)结合使用。
2
在384孔板上获得可重复性分析结果。
使用FastLane Kit对NFκB1(核转录因子)的表达水平进行一步法real-time RT-PCR分析,包含HeLa细胞的384孔板具有可重复的CT值。
3
对单细胞也能获得线性结果。
使用FastLane Kit可实现1–10,000个HeLa细胞中β-actin转录本的线性检测(分析连续稀释的裂解物)。而Supplier SIII的同类试剂盒的结果无线性。
Performance
FastLane Cell Probe Kit可高灵敏地进行基于探针的一步法real-time RT-PCR,无需纯化RNA(参见"Sensitive probe detection without RNA purification")。与同类试剂盒相比具有更高的灵敏度以及线性化(参见"Greater sensitivity than other kits"和"Linear detection down to a single cell"),且高度可重复(参见"Highly reproducible analysis of a 384-well plate")。此外,基因组DNA不会干扰定量分析。
Principle

FastLane Cell Probe Kit应用FastLane技术制备细胞裂解液,用于一步法real-time RT-PCR。该试剂盒与多种类型的探针化学试剂相兼容,包括水解探针(例如TaqMan或其他双标签探针),变异杂交(FRET)探针以及分子信标探针。即用型RT-PCR预混液含有新型的RT-PCR缓冲液和热启动DNA聚合酶,无需优化探针浓度或其他PCR参数。

Procedure

FastLane Cell Probe Kit在12分钟内即可通过3步获得裂解液:细胞洗涤、细胞裂解并稳定RNA、去除基因组DNA以及预制裂解液。预制的裂解液可直接用于一步法real-time RT-PCR。

该试剂盒提供足量试剂用于96孔板培养细胞的裂解以及后续的real-time RT-PCR(50 µl PCR体积),并可用于分析PCR体积为20 µl的单个384孔细胞培养板,如所需PCR体积为50 µl,需另购额外的QuantiTect Probe RT-PCR Kit(200)。

Applications

FastLane Cell Probe Kit是进行快速、高通量基因分析实验的理想工具,例如:

  • 验证siRNA介导的基因沉默效果
  • 药物筛查
  • 基因调控检测
Features
Specifications
应用 Probe-based, real-time, one-step RT-PCR
酶活 Primer annealing
预混液 Yes
反应类型 One-step, cell lysis, RNA stabilization, DNA digestion
real-time或终点法PCR Real time
样本/目标类型 Cultured cells
单一或多重 Single
有/无热启动酶 Without hotstart