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FastLane Cell Multiplex Kits

用于直接对培养细胞进行多重一步法real-time RT-PCR,无需纯化RNA

  • 无需纯化RNA,显著节省时间
  • 从细胞到real-time RT-PCR结果只需3个步骤
  • 可对96孔板或384孔板进行高通量分析
  • 独特的gDNA Wipeout Buffer实现只检测RNA
  • 优化的试剂和实验方案可立即开始实验
FastLane Cell Multiplex Kits加快并简化real-time RT-PCR,适用于需要高通量基因表达分析的实验。该试剂盒提供一系列缓冲液用于从培养细胞制备FastLane裂解液。除了用于裂解细胞,缓冲液也可稳定细胞RNA并去除基因组DNA。FastLane裂解液可直接用于多重一步法real-time RT-PCR(含有或不含ROX阴性对照染料)。另有多种检测方式可供选择:应用SYBR Green检测或序列特异性探针检测。
Cat No./ID: 216513
FastLane Cell Multiplex Kit (200)
FastLane Cell One-Step Buffer Set, 2x QuantiTect Multiplex RT-PCR Master Mix (contains ROX dye), and QuantiTect Multiplex RT Mix
Cat No./ID: 216713
FastLane Cell Multiplex NR Kit (200)
FastLane Cell One-Step Buffer Set, 2x QuantiTect Multiplex RT-PCR NR Master Mix (without ROX dye), and QuantiTect Multiplex RT Mix

FastLane Cell Multiplex Kits适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
可靠的验证基因沉默。
在包含HCT116细胞的96孔板中,其中5孔转染有核纤层蛋白A/C siRNA(核纤层蛋白)或非沉默siRNA(NS)。使用FastLane Kit及针对核纤层蛋白A/C(结构蛋白)和18S rRNA(内源性对照)的TaqMan assay,利用多重real-time RT-PCR分析细胞。(数据由美国Genzyme Corporation的Angela Quinn提供。)
1
多重分析无需进行优化。
FastLane Cell Multiplex Kits无需反复多次的优化PCR反应参数。
2
96孔板规格,分析具有高度可重复性
使用FastLane Kit对NFκB1(核转录因子)和GAPDH(内源性对照)的表达水平进行多重一步法real-time RT-PCR分析,包含HeLa细胞的96孔板具有可重复的CT值。
Performance
使用FastLane Cell Multiplex Kits,96孔或384孔的多重分析可高度重现(参见"Highly reproducible analysis of a 96-well plate")。该试剂盒是用于快速高通量基因表达分析的理想产品,例如siRNA介导的基因抑制(参见"Reliable validation of gene silencing")。在同一反应中对靶基因和控制基因的扩增,具有相似的高PCR扩增效率,可通过ΔΔCT方法进行相对定量分析。
Principle

FastLane Cell Multiplex Kits应用FastLane技术,直接通过培养细胞制备细胞裂解液用于一步法real-time RT-PCR。该试剂盒由于无需RNA纯化,可加快并简化对培养细胞的real-time PCR分析,是用于快速高通量基因表达分析,例如siRNA介导的基因抑制等的理想产品。

不同于其他方法,FastLane Cell Multiplex Kits提供优化的预混液,含有新型的RT-PCR缓冲液和热启动DNA聚合酶,可在首次多重一步法real-time RT-PCR中获得理想结果(参见Multiplex analysis with no optimization steps)。两种规格的试剂盒可供选择:FastLane Cell Multiplex Kit配合需要ROX染料进行荧光校准的热循环仪,以及配合其他多种热循环仪的FastLane Cell Multiplex NR Kit。

Procedure

FastLane Cell Multiplex Kits应用FastLane技术,12分钟内通过3步即可获得裂解液:细胞洗涤、细胞裂解并稳定RNA、去除基因组DNA以及预制裂解液。预制的裂解液可直接用于一步法real-time RT-PCR。

每个试剂盒含有足够的试剂用于96孔板培养细胞的裂解以及后续的real-time RT-PCR(50 µl PCR体积), 并可用于分析PCR体积为20 µl的单个384孔细胞培养板,如所需PCR体积为50 µl,需另购额外的QuantiTect Multiplex RT-PCR Kit(200)或QuantiTect Multiplex RT-PCR NR Kit(200)。

Applications

FastLane Cell Multiplex Kits是进行快速、高通量基因分析实验的理想工具,例如:

  • 验证siRNA介导的基因沉默效果
  • 药物筛查
  • 基因调控检测
Features
Specifications
应用 Multiplex, real-time, one-step RT-PCR
酶活 Primer annealing
预混液 Yes
反应类型 One-step, cell lysis, RNA stabilization, DNA digestion
real-time或终点法PCR Real time
样本/目标类型 Cultured cells
单一或多重 Multiplex
有/无热启动酶 Without hotstart
fragment fix placeholder