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miScript miRNA Mimics

通过合成miRNA进行miRNA功能和基因调控研究

  • 模拟内源性miRNAs,可直接用于转染
  • 基于miRBase中的所有人类、小鼠和大鼠的miRNAs而设计
  • 可灵活选择规格、包装和纯度
  • 为miRBase中未列出的miRNAs提供订制设计
  • 可通过GeneGlobe便利的订购
miScript miRNA Mimics是化学合成的双链RNAs,在转染到细胞后模拟内源成熟miRNAs。提供细胞培养级纯度(>90%纯度)和动物级纯度(经HPLC纯化;用于体内实验)的模拟物。如需进行灵活的筛选实验,可选择miScript miRNA Mimic Plates,以96孔板或384孔板形式提供预制或用户订制的miScript miRNA Mimics。miScript miRNA Inhibitors也可用于类似的实验。如需进行转染实验,QIAGEN提供HiPerFect Transfection Reagent进行miRNA Mimic转染实验,Attractene Transfection Reagent进行miRNA Mimic-DNA共转染实验。
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  • CpG loci identification numbers (CG#) (e.g., CG17753661)

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miScript miRNA Mimic
1 nmol (cell-culture grade), 5 nmol (cell-culture grade), or 20 nmol (animal grade) miScript miRNA Mimic, provided in tubes
219600 Varies Enter your targets in search box above.

miScript miRNA Mimics适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
内源性miRNA和miScript miRNA Mimic的下调效果相当。
miR-1在HeLa S3细胞中呈非内源性表达。miR-16在HeLa S3细胞中呈高水平的内源性表达(Lagos-Quintana, M. et al. [2001] Identification of novel genes coding for small expressed RNAs. Science 294, 853.)。使用HiPerFect Transfection Reagent,将3' UTR带有miR-1结合位点的荧光素酶报告基因重组体转染至HeLa S3细胞(6 x 104个细胞/孔);共转染3' UTR带有miR-1结合位点的荧光素酶报告基因重组体及miR-1 Mimic;或者转染3' UTR带有miR-16结合位点的荧光素酶报告基因重组体。24小时后,检测荧光素酶活性。miR-1 Mimic对荧光素酶水平的下调效果类似内源性miR-16。
1
miScript miRNA Mimic可保持稳定长达72小时。
使用HiPerFect Transfection Reagent,将阴性对照或miR-1 Mimic转染至HeLa S3细胞(6 x 104个细胞/孔)。24小时后检测,并使用Attractene Transfection Reagent,将带有miR-1结合位点的荧光素酶报告基因重组体转染至细胞内。在标示的时间点后,通过检测荧光素酶活性检测miR-1水平。
2
miR-1模拟物转染后在蛋白水平的下调作用。
HDAC4预计为miR-1的靶点,且在3' UTR有2个miR-1结合位点(Chen, J.F. et al. [2006] The role of microRNA-1 and microRNA-133 in skeletal muscle proliferation and differentiation. Nat. Genet. 38, 228.)。使用HiPerFect Transfection Reagent,将各种浓度的miR-1 Mimic转染至HeLa S3细胞(8 x 104个细胞/孔)。miR-1 #1、miR-1 #2和miR-1 #3是不同批次的miR-1 Mimic。24和48小时后,[A] 利用western印迹分析HDAC4蛋白水平。同时分析微管蛋白,作为内部对照(未显示)。24小时后未观察到任何反应。48小时后,蛋白水平显著降低。[B] 使用50 nM miR-1 Mimic转染后,使用miScript System,利用real-time PCR分析HDAC4转录本的水平。阴性对照为AllStars Negative Control。采用GAPDH和阴性对照对结果进行标准化,以2-ΔΔCT表示。在24小时或48小时,转录本水平未发生明显改变。
Performance
miScript miRNA Mimics与内源性miRNAs相同会使得基因表达下降(参见"Comparable downregulation by endogenous miRNA and miScript miRNA Mimic")。通常在翻译水平观察到基因表达下降(参见"Downregulation at protein level after miR-1 Mimic transfection")。转染后,miScript miRNA Mimics可有效抑制基因表达至多72小时(参见"miScript miRNA Mimic stable for 72 hours")。
Principle

模拟物转染及下游基因表达分析或表型分析,用于确定特定miRNAs的靶向和作用。这些实验能够研究个体miRNAs失调的生物效应及确定作为个体miRNAs靶向的特异性基因。抑制剂转染后基因表达增强表明研究中的miRNA由该基因调控。类似的研究也可使用miScript miRNA Inhibitors。一般而言,这样的实验都要涉及到模拟物或抑制剂的转染或与携带miRNA结合位点融合报告基因的载体结构共转染。下游分析包括报告分析、real-time PCR、微阵列分析或蛋白质分析。

Procedure

miScript miRNA Mimics提供适合当前版本microRNA数据库(miRBase)中的人类、小鼠、大鼠和病毒miRNA。QIAGEN's GeneGlobe数据库持续更新数据,确保模拟物和抑制剂与最新的miRBase中数据尽量匹配。确保得到高度准确、当前的miRNA序列信息。若miRBase中没有您所需的miRNA的数据,可访问用户订制miScript miRNA产品设计页面,输入模拟物名称,提供目标序列,我们的设计工具即可提供您所需的模拟物,供您订购。

可灵活选择规格,用少量模拟物进行低通量分析或大量模拟物进行高通量筛查实验。miScript miRNA Mimics以试管形式(1 nmol或5 nmol)提供细胞培养级纯度(>90%,由专门的合成和纯化流程提供)的模拟物。用于体内实验,经HPLC纯化、动物级纯度的miScript miRNA Mimics也可订购得到,规格为20 nmol(以试管形式提供)。对于中到高通量应用,提供96孔板(1 nmol或5 nmol)或384孔板形式(1 nmol),满足您的实验需求。只需上传预设计的Excel表格(miRBase中列出)或订制(miRBase中未列出的)miScript miRNA Mimics,选择你所需的孔板形式,即可查询并订购孔板。

Applications
  • miRNA研究
  • 基因调控研究
Features
Specifications
设计 Predesigned and custom design avaliable
规格 Single tubes, 96-well & 384 well plates
修饰 None
规格 1 nmol, 5 nmol, 20 nmol
提供的序列 No
物种 Human, mouse, rat

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