QIAquick PCR Purification Kit

纯化多至10 μg PCR产物,100 bp–10 kb

  • 即用型DNA回收率高达95%
  • 3个简单步骤即可回收多达10 kb DNA片段
  • 含有凝胶上样染料,方便样本分析

QIAquick PCR Purification Kit包含离心柱、缓冲液和收集管,利用硅胶模技术纯化100 bp以上的PCR产物。 通过简单快速的结合、洗涤、洗脱步骤,使用30–50 μl洗脱体积即可纯化多达10 kb的DNA片段。内置的pH指示剂可方便测定DNA与离心柱结合的最佳pH值,整个过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化运行。

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QIAquick PCR Purification Kit (50)
For purification of 50 PCR reactions: 50 QIAquick Spin Columns, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
28104
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QIAquick PCR Purification Kit (250)
For purification of 250 PCR reactions: 250 QIAquick Spin Columns, Buffers, Collection Tubes (2 ml)
28106
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QIAquick Spin Columns (100)
For DNA fragment purification from PCR, gel fragments and enzymatic reactions
28115
询价

QIAquick PCR Purification Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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QIAquick和MinElute实验流程。|PCR后完全去除引物。|GelPilot Loading Dye。|pH Indicator Dye。|离心柱操作选择 — D。|离心柱操作选择 — E。|离心柱操作选择 — C。|离心柱操作选择 — B。|离心柱操作选择 — A。|
QIAquick和MinElute配合离心柱或真空底座,进行简单的结合-洗涤-洗脱实验流程。|使用QIAquick PCR Purification Kit纯化之前(b)和之后(a)的PCR产物分析如图所示。在1% TAE琼脂糖凝胶上电泳分析样本。M:分子量标准。|GelPilot Loading Dye含有3种示踪染料,有助于优化DNA分辨率。|利用溶解液和结合缓冲液中的pH指示剂染料可轻松观测DNA吸附的最佳pH值 (pH ≤7.5)。如果琼脂糖凝胶电泳缓冲液使用频繁或者配制不当,则会出现错误的结合混合物pH值。此时,可加入10 µl 3 M醋酸钠 (pH 5.0) 轻松调整pH值。|QIAvac 24 plus。|QIAcube全自动核酸纯化仪。|真空底座和Luer Connectors。|QIAvac 24。|微量离心。|
性能
QIAquick PCR Purification操作流程去除引物、核苷酸、酶、矿物油、盐和DNA样本中的其他杂质(参见"Complete primer removal after PCR")。通过使用微型离心机或者真空底座,可以纯化得到100 bp–10 kb的DNA片段。
原理

QIAquick Kits配备有硅胶膜,在高盐度缓冲液中结合DNA,应用低盐度缓冲液或水洗脱DNA。纯化过程去除引物、核苷酸、酶、矿物油、琼脂糖、溴化乙锭和DNA样本中的其他杂质(参见"Complete primer removal after PCR")。硅胶膜技术避免了松散树脂常见的问题和不便。特制的结合缓冲液可促进吸附特定片段范围内的DNA分子。 

凝胶上样染料

为更快、更方便地处理和分析样本,已提供凝胶上样染料。GelPilot Loading Dye含有3种示踪染料(二甲苯蓝、溴酚蓝和orange G),便于优化跑胶时间,避免小片段DNA跑得过远(参见"GelPilot Loading Dye")。

操作流程

QIAquick体系采用了简单的结合、洗涤、洗脱的流程(参见"QIAquick and MinElute procedure")。结合缓冲溶液可直接加入到PCR样本或者其他酶试剂中,然后将混合液上样到QIAquick离心柱。结合缓冲液含有pH值指示剂,可方便地确定DNA结合的最佳pH值(参见"pH Indicator Dye")。核酸在高盐度条件下结合到硅胶膜上,洗去杂质,使用小体积的低盐缓冲液或水洗脱纯DNA,得到的DNA可直接用于后续应用。 

处理过程

QIAquick 离心柱提供两个方便的操作方法。离心柱可放在传统的台式微型离心机上或通过适配器连接到任何真空底座上,如QIAvac 24 Plus和QIAvac Luer Adapters。QIAquick PCR Purification Kit以及其他的QIAGEN离心柱试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪器上全自动化运行,确保高产量和标准化的结果(参见"Spin column handling options A, B, C, D, and E")。

应用

QIAquick系统纯化的DNA片段可直接用于各种应用,包括测序、微阵列分析、连接和转化、限制性酶切、标记、显微注射、PCR和体外转录。

特点
参数
结合能力 10 µg
洗脱体积 > 30 µl
规格 Tube
片段大小 100 bp – 10 kb
去除片段 < 40mers
处理 Manual
样本类型:应用 ssDNA or dsDNA from PCR and other enzymatic reactions
技术 Silica technology
回收DNA的类型 ss DNA and dsDNA

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用户开发的实验方案
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The protocol has been used successfully for Cy3-, Cy5-, and biotin-labeling of cDNA from <50 ng of total RNA or poly A+ mRNA.
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参考文献
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图片
QIAquick 96 on QIAvac 96/BioRobot systems
QIAquick和MinElute实验流程。
QIAquick和MinElute配合离心柱或真空底座,进行简单的结合-洗涤-洗脱实验流程。
Complete primer removal after PCR
PCR后完全去除引物。
使用QIAquick PCR Purification Kit纯化之前(b)和之后(a)的PCR产物分析如图所示。在1% TAE琼脂糖凝胶上电泳分析样本。M:分子量标准。
GelPilot Loading Buffer
GelPilot Loading Dye。
GelPilot Loading Dye含有3种示踪染料,有助于优化DNA分辨率。
ILLU_0104_MinElute
pH Indicator Dye。
利用溶解液和结合缓冲液中的pH指示剂染料可轻松观测DNA吸附的最佳pH值 (pH ≤7.5)。如果琼脂糖凝胶电泳缓冲液使用频繁或者配制不当,则会出现错误的结合混合物pH值。此时,可加入10 µl 3 M醋酸钠 (pH 5.0) 轻松调整pH值。
离心柱操作选择 — D。
QIAvac 24 plus。
离心柱操作选择 — E。
QIAcube全自动核酸纯化仪。
QIAprep Spin Column handling options
离心柱操作选择 — C。
真空底座和Luer Connectors。
QIAprep Spin Column handling options
离心柱操作选择 — B。
QIAvac 24。
QIAprep Spin Column handling options
离心柱操作选择 — A。
微量离心。