text.skipToContent text.skipToNavigation

miScript Primer Assay Plate

使用miScript PCR系统以及定制的实验平板对成熟的miRNA分子进行定量
  • 可以方便的平板模式,进行自定义配置的miScript Primer Assay
  • 搭配miScript PCR系统进行微流体技术应用的理想之选
  • 可通过GeneGlobe plate designer方便地设计并订购
  • 可对miRNA分子进行敏感、特异性的检测和定量
  • 对miRBase数据库未列出的成熟miRNA分子,可定制实验

可自定义配置的miScript Primer Assay平板,支持灵活设计miRNA实验,以满足单独额应用需求。通过GeneGlobe网页上的易用型拖放工具,可以将目前版本miRBase数据库中所列出的miRNA分子的特异性引物选择出来,并放置在96孔板或者384孔板的任意孔中。每一种miRNA特异性试剂均以冻干引物的小孔形式提供,能够通过标准的real-time cycler或者Fluidigm BioMark系统经real-time PCR反应重新制备成溶液,以获得miRNA检测所要求的浓度。96孔板现以两种不同的预定尺寸。对于96孔板,最少要预定24种引物,而对于384孔板则要预定96种引物。
产品 Product no. 货号 目录价:
 
 
Show details
    varies
Can't order online?
To place an order via phone, email or for requesting a quote, please provide the product’s name, number and catalog number.
产品 Product no. 货号 目录价:
miScript Primer Assay Plate
miScript Primer Assays in 96 or 384-well format, plate configuration specified by the customer
218540 Varies Create and order
Available Controls
Configure
产品 Product no. 货号 目录价:
 
 
Show details
    varies
Can't order online?
To place an order via phone, email or for requesting a quote, please provide the product’s name, number and catalog number.

miScript Primer Assay Plate适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
准确检测低至10拷贝的miRNA。
使用miScript II RT Kit及[A] miScript HiSpec Buffer或[B] miScript HiFlex Buffer(试剂盒中均有提供)以及合成miR-21生成cDNA。使用miScript PCR System及不同量(10个拷贝至106个拷贝)的cDNA进行real-time PCR。在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行real-time PCR。随着miRNA拷贝数增加,获得的CT值呈线性下降,证明了不同的模板量的灵敏检测。
1
线性范围广,扩增效率高。
使用miRNeasy Mini Kit从HeLa S3细胞中纯化总RNA。使用miScript II RT Kit及 [A] miScript HiSpec Buffer或 [B] miScript HiFlex Buffer(试剂盒中均有提供),从不同量的RNA(10 pg至2 µg)中制备cDNA。使用针对miR-16、miR-20a或miR-21的miScript Primer Assay,以各cDNA作为模板进行real-time PCR反应。线性标准曲线显示了miScript PCR System较宽的动态范围和高扩增效率。
Performance
使用miScript Primer Assays和miScript PCR系统对成熟miRNA分子进行检测,可确保得到可重复性、可靠的结果。由于很多miRNA分子的表达水平很低,敏感度是确保得到可靠数据的关键。miScript PCR系统具有出色的敏感度,可以检测到低至10个拷贝的miRNA分子(参见Accurate detection of as low as 10 miRNA copies)。仅需要10pg总DNA,就能够得到准确、可重复的miRNA数据(参见Broad dynamic range and high amplification efficiencies)。扩增效率高且稳定,因此能用∆∆CT方法准确地对多种miRNA分子进行表达分析。
Principle
miScript PCR 系统使用基于SYBR Green的real-time PCR技术,可对miRNA进行敏感、特异性的定量和分析。miScript PCR系统包含了将RNA转换成cDNA,以及后续检测miRNA的real-time PCR实验的所有步骤。

为完成对成熟miRNA分子的检测和定量,miScript PCR系统使用如下组分:

miScript II RT Kit — 这一试剂盒可实现简便的一步法cDNA合成。在检测上百个miRNA分子时,可以采用一次单独的cDNA合成反应。其所采用的双重缓冲液体系能够满足real-time PCR反应miRNA定量检测应用的独特需要。
miScript PreAMP PCR Kit和Primer Mixes — 这一试剂盒和引物的混合物能够对有限量的miRNA分子进行无偏的预扩增,以便进行后续的miRNA分析。

miScript SYBR® Green PCR Kit — 这一试剂盒包含了QuantiTech SYBR Green PCR 预混液和miScript通用引物。miScript通用引物为反向引物,可以结合miScript Primer Assay或miScript miRNA PCR Array,对miRNA分子进行检测。

miScript Primer Assay — miScript Primer Assays是用于检测成熟的miRNA分子的miRNA特异性正向引物,其采用了miRBase数据库中的最新信息。
Procedure
检测成熟的miRNA分子,需使用miScript II逆转录试剂盒中的miScript HiSpec缓冲液或者miScript HiFlex缓冲液,通过逆转录反应制备cDNA分子,并将其作为real-time PCR反应的模板分子。real-time PCR反应使用miRNA特异性的miScript Primer Assay(正向引物)和miScript SYBR Green PCR Kit进行。而miScript SYBR Green PCR Kit中包含了miScript通用引物(反向引物)和QuantiTect SYBR Green PCR预混液。

为检测其它的非编码RNA,需使用miScript II RT Kit中的miScript HiFlex缓冲液,通过逆转录反应制备cDNA,并将其用作real-time PCR反应的模板分子。real-time PCR反应使用miScript Primer Assay(正向引物)和miScript SYBR Green PCR Kit进行,后者包含了miScript通用引物(反向引物)和QuantiTect SYBR Green PCR预混液。如果暂无针对您感兴趣的小RNA的miScript Primer Assay,我们亦可根据您的要求定制。
Applications

miScript Primer Assays Plates作为miScript PCR System的一部分,用于:

  • 使用Fluidigm BioMark系统对miRNA进行分析
  • 定量检测成熟miRNA 
  • snoRNA检测