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TopTaq Master Mix Kit

高度可靠的终点法PCR,无可比拟的方便性

  • 易于使用的预混液,操作步骤最少化
  • 冷藏储存节省了解冻时间
  • 可靠的高产率PCR
  • 方便的室温操作
  • 优化的操作程序适合所有PCR实验

TopTaq Master Mix Kit结合了TopTaq DNA Polymerase和即用型预混液的所有优势,简单易用,包含TopTaq DNA Polymerase,将优化需求最小化的TopTaq PCR Buffer和dNTPs。酶保存缓冲液中有独特的TopTaq稳定剂,使得TopTaq Master Mix可保存在4°C,并在室温下进行反应,无需耗时的解冻试剂。所有的成分都含在即用型混合液中,减少了移液步骤,降低了污染的风险。TopTaq Master Mix即使在25°C或4°C下存放很长一段时间,还是可以获得高产率的PCR产物。

Cat No./ID: 200403
TopTaq Master Mix Kit (250)
For 200 x 50 µl reactions: 2x TopTaq Master Mix containing 250 units of TopTaq DNA Polymerase in total, 10x CoralLoad Concentrate, and RNase-Free Water

TopTaq Master Mix Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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PCR反应的产量高,不受储存条件影响。
使用TopTaq Master Mix进行PCR,预混液可在–20°C、4°C或25°C条件下保存4个月。使用标准优化流程从人基因组DNA中扩增两个不同的基因(prp, 750 bp和HugL, 1200 bp。结果表明可获得高产量特异性PCR产物。[A]QIAxcel System获得的凝胶图片。Markers: GelPilot 1 kb Plus Marker和QX Alignment Marker 15 bp/10 kb。[B] QIAxcel System一次运行可对至多96个样本进行完全自动化的灵敏、高分辨率的毛细管电泳。
Performance
TopTaq Master Mix Kit用于标准的和特有的终点式PCR应用,无需优化。TopTaq Master Mix即使在25°C或4°C下保存4个月还是可以获得高产率的PCR产物,说明TopTaq Master Mix能够提供非常稳定和可靠的扩增体系(参见"Reliable high-yield PCR")。TopTaq稳定剂与TopTaq DNA Polymerase结合,防止聚合酶在长期储存过程中灭活。预混液中含有独特的PCR,具有均衡的钾和铵离子,改进特异性引物-模板的退火条件,并同时降低非特异性退火条件。TopTaq DNA Polymerase比其他供应商测试的DNA聚合酶具有更好的性能,确保了即使在使用较低的模板量,也可获得高产量的特异性产物和单独的片段大小(参见"High PCR product yields without optimization”)。
Principle

由TopTaq Master Mix Kit研发用于提供前所未有的应用便捷性和高度可靠的终点式PCR。在研发TopTaq PCR体系之前,所有PCR酶都需要在–20°C下储存。因为在酶保存缓冲液中含有独特的专有TopTaq稳定剂,TopTaq Master Mix Kit是首款可在4°C下储存的试剂盒。该即用型预混液规格提供了更大的便利。由于TopTaq DNA Polymerase的使用,甚至在扩增不同大小的片段时,也可获得高产量的特异性产物。(参见"High PCR product yields without optimization")。

TopTaq PCR Buffer

新型的TopTaq PCR Buffer有助于扩增特异性PCR产物。在每个PCR循环的退火步骤中,相对非特异性引物结合,该缓冲液大大增加了特异性引物结合的比率。由于KCl和(NH4)2SO4独特均衡的结合,相比传统的PCR缓冲液,该PCR缓冲液提供了更广泛的温度和Mg2+浓度,以及严格的引物-退火条件(参见"Increased specificity of primer annealing")。通过调节退火温度或Mg2+浓度可显著减少优化PCR反应的需求,有时不需要优化过程。

TopTaq稳定剂

TopTaq与TopTaq DNA Polymerase结合,防止在长期储存过程中聚合酶灭活(参见"Stabilization at 4°C"),同时防止模板DNA和引物在低温下与聚合酶结合。在初始的降解步骤中,TopTaq稳定剂能从聚合酶中分离而不影响聚合酶的活性。

CoralLoad Concentrate

为了更方便使用,成套提供TopTaq Master Mix Kit和CoralLoad Concentrate。CoralLoad Concentrate包含两种胶示踪染料。该独特的试剂提高了移液可视化,有助于去除DNA迁移距离并优化琼脂糖凝胶跑样时间。使用CoralLoad Concentrate时,可将PCR产物直接上样到琼脂糖凝胶上而不需要事先另外加缓冲液(参见"Convenient CoralLoad Concentrate")。

Procedure
TopTaq Master Mix Kit结合了独特的TopTaq DNA Polymerase和即用型预混液的所有优势。由于TopTaq Master Mix Kit,无需单独的移液部分组件,并能最大限度地减少污染风险和移液可视化,使PCR反应体系构建快速简单。在初始的降解步骤中,TopTaq稳定剂能从聚合酶中分离而不影响聚合酶活性。这增加了便利,并能即可进行反映设置,无需冰上工作,节省了解冻试剂所需的时间(参见"TopTaq procedure")。
可靠的高产量PCR,无需优化过程

经优化的实验方案适用于所有PCR检测,去除了个别引物-模板体系中漫长的实验参数优化需要,能节省大量的时间和成本。TopTaq Master Mix即使在25°C或4°C下保存4个月还是可以获得高产率特异性PCR产物(参见"Reliable high-yield PCR")。

Applications

TopTaq Master Mix Kit高度适用于所有终点法PCR应用。

Features
Specifications
应用 PCR, RT-PCR, DNA Fingerprinting
包括dNTPs Yes (in Master Mix)
酶活 5' -> 3' exonuclease activity
预混液 Yes
反应类型 PCR amplification
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
储存条件 Fridge storage and room temperature setup
有/无热启动酶 Without Hotstart

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试剂盒操作手册 (1)
For standard and specialized end-point PCR applications without the need for optimization
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