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TopTaq DNA Polymerase

高度可靠的PCR实验,无可比拟的方便性

  • 4°C的储存条件,可立即进行反应体系构建
  • 方便的室温操作
  • 经优化的操作流程适合所有PCR实验
  • 特异性扩增,DNA产量高

TopTaq DNA Polymerase具有一系列方便易用的特点,提供前所未有的应用便捷性和高DNA产量。酶保存液中含有独特的TopTaq稳定剂,可以在4°C下稳定保存TopTaq DNA Polymerase,并且在室温下进行反应体系构建,无需费时的解冻过程。CoralLoad Concentrate包含两种胶示踪染料,便于移液可视化,并可将PCR产物直接上样电泳。即使在相同的Mg2+浓度和退火温度下扩增不同长度的片段,依然可获得高产量PCR产物。

Cat No./ID: 200201
TopTaq DNA Polymerase (50)
50 units TopTaq DNA Polymerase (proprietary recombinant polymerase isolated from a thermophilic eubacterium), 10x PCR Buffer (contains 15 mM MgCl2), 10x CoralLoad Concentrate, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
Cat No./ID: 200203
TopTaq DNA Polymerase (250)
250 units TopTaq DNA Polymerase (proprietary recombinant polymerase isolated from a thermophilic eubacterium), 10x PCR Buffer (contains 15 mM MgCl2), 10x CoralLoad Concentrate, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
Cat No./ID: 200205
TopTaq DNA Polymerase (1000)
4 x 250 units TopTaq DNA Polymerase (proprietary recombinant polymerase isolated from a thermophilic eubacterium), 10x PCR Buffer (contains 15 mM MgCl2), 10x CoralLoad Concentrate, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2
Cat No./ID: 200207
TopTaq DNA Polymerase (5000)
5000 units TopTaq DNA Polymerase (proprietary recombinant polymerase isolated from a thermophilic eubacterium; supplied in a single vial), 10x TopTaq PCR Buffer (contains 15 mM MgCl2), 10x CoralLoad Concentrate, 5x Q-Solution, 25 mM MgCl2

TopTaq DNA Polymerase适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


1
TopTaq实验流程。
由于酶储存缓冲液中含有的TopTaq Stabilizer具有独特性质,TopTaq DNA Polymerase是第一个可以在4°C下保存的PCR试剂盒。TopTaq Stabilizer结合到TopTaq DNA Polymerase上,阻止聚合酶的失活。在低温下,模板DNA和引物也不能结合到聚合酶上。在变性步骤初期,TopTaq Stabilizer从聚合酶上自由分离,不影响聚合酶活性。这增加了快速构建反应体系的便利性,无需使用冰,节省了融化试剂所需的时间。
2
无需优化,获得高产量PCR产物。
[A]按照标准的已优化的实验方案,在相同的循环条件下,使用TopTaq DNA Polymerase扩增哺乳动物基因组DNA的14个PCR产物,片段大小在100 bp至2 kb之间。[B]使用其他供应商的DNA聚合酶扩增同样的4个靶序列(11–14泳道),循环条件相同。对于不同的片段大小,TopTaq DNA Polymerase (QIAGEN) 的特异性PCR产物均有更高产量。
4
4°C时保持稳定。
[A] TopTaq DNA Polymerase在聚合酶的表面有小分子量的TopTaq Stabilizer,因此可在4°C或室温下保持稳定。[B]更高温度下,TopTaq Stabilizer与聚合酶分离开,不影响酶活性。
Performance
TopTaq DNA Polymerase用于常规的和特殊的终点式PCR应用。TopTaq DNA Polymerase是第一款可以在4°C下储存的PCR试剂盒。TopTaq Stabilizer(包含在酶储存缓冲液中)结合TopTaq DNA Polymerase,防止在长期储存过程中聚合酶灭活。在初始的降解步骤中,TopTaq稳定剂从聚合酶中分离而不影响其活性。TopTaq DNA Polymerase比其他供应商测试的DNA聚合酶有更好的性能,甚至在使用低模板量时,也能确保特异性产物的高产量和独立的片段大小(参见"High PCR product yields without optimization“)。
Principle

TopTaq DNA Polymerase是重组的94 kDa耐热DNA聚合酶。由QIAGEN研发的TopTaq DNA Polymerase,提供前所未有的应用便捷性和高度可靠的终点式PCR。直到研发了TopTaq PCR体系,所有PCR酶都需要在–20°C储存;然而,因为酶保存液中有独特的专有TopTaq稳定剂,TopTaq DNA Polymerase是第一款能在4°C下储存的试剂盒。

高产量扩增

TopTaq DNA Polymerase配合新型的TopTaq PCR Buffer使用,有利于通过提供高比率的特异性-非特异性引物结合来扩增特异性PCR产物。由于KCl和(NH4)2SO4独特的均衡结合,比传统的PCR缓冲液,该PCR缓冲液提供广泛的退火温度和Mg2+浓度条件以及严格的引物-退火条件(参见"Increased specificity of primer annealing")。通过调节退火温度或Mg2+浓度可显著减少优化PCR过程的需要,有时不需要优化。因此,TopTaq DNA Polymerase提供与Taq DNA Polymerase相同的可靠性和特异性,并且能额外地在一些PCR反应体系中提供优化的性能,得到更多的PCR产物(参见"High yields of PCR product without optimization")。

TopTaq稳定剂

TopTaq稳定剂与TopTaq DNA Polymerase在4°C以及室温下结合,防止聚合酶在长期储存中降解,同时避免模板DNA和引物在低温下与聚合酶结合。在初始的降解步骤中,TopTaq稳定剂从聚合酶中分离,而不影响聚合酶的活性(参见"Stabilization at 4°C")。

CoralLoad Concentrate

为了更方便使用,成套提供TopTaq DNA Polymerase和CoralLoad Concentrate。CoralLoad Concentrate包含两种胶示踪染料。该独特的试剂提高了移液可视化,有助于去除DNA迁移距离并优化琼脂糖凝胶跑样时间。使用CoralLoad Concentrate时,可将PCR产物直接上样到琼脂糖凝胶上而不需要事先另外加缓冲液(参见"Convenient CoralLoad Concentrate")。

优化的实验方案和缓冲液

独特的PCR缓冲液,具有均衡的钾和铵离子,配合TopTaq DNA Polymerase使用能促进特异性引物-模板退火,同时减少非特异性退火。即使使用少量模板也能获得最大量的特异性产物。独特的缓冲液制备和单独的预优化实验方案消除了个体-引物体系实验参数优化的需求,节省了时间和成本。甚至使用相同的Mg2+浓度和退火温度扩增大量不同大小的片段,也可获得高产量的特异性扩增产物(参见"High PCR product yields without optimization")。

Q-Solution

新型的PCR辅助剂有助于通过修改DNA熔化行为来扩增困难模板。使用该独特的试剂通常能进行或促进欠佳的PCR反应。不同于DMSO和其他的PCR辅助剂, Q-Solution可在各种引物-模板体系的确定工作浓度下使用,且无毒。

Procedure

由于酶保存液中含有独特的专有TopTaq稳定剂,TopTaq DNA Polymerase是第一款可在4°C下常规储存的试剂盒。在初始的降解步骤中,TopTaq稳定剂可从聚合酶中分离而不影响聚合酶活性。这提高了便利性,能够立即进行反应设置,无需使用冰,节省了解冻过程的时间(参见"TopTaq procedure")。所有组件都可以在室温下相结合,无需冰上工作。独特的缓冲液制备和单独的预优化实验方案消除了单个引物-模板体系实验参数的优化需求。

Applications

TopTaq DNA Polymerase高度适用于所有终点法PCR应用。

Features
Specifications
应用 PCR, RT-PCR, DNA fingerprinting
包括dNTPs No
酶活 5' -> 3' exonuclease activity
预混液 No
反应类型 PCR amplification
real-time或终点法PCR Endpoint
样本/目标类型 Genomic DNA and cDNA
单一或多重 Single
储存条件 Fridge storage and room temperature setup
有/无热启动酶 Without Hotstart

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试剂盒操作手册 (1)
For standard and specialized end-point PCR applications without the need for optimization
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