Investigator Quantiplex HYres Kit

定量检测法医学检材样本中的人和人类男性的DNA
  • 同时定量人和人类男性的DNA
  • 结果可靠,灵敏度可达1 pg/µl DNA
  • 在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上51分钟即可完成PCR
  • 自带内质控,可检测PCR扩增效率或PCR抑制物
  • 反应体系构建可完全自动化
Investigator Quantiplex HYres Kit是即用型体系,采用real-time PCR技术定量检测人和人类男性的DNA。该试剂盒具有出色的灵敏度和反应速度,适用于检测样本是否含有足够DNA进行DNA指纹图谱分析(如STR或DIP分析)或是否含有抑制剂存在。Investigator Quantiplex HYres Kit能够获得可靠的结果,不受样本性别和种族的影响。
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Investigator Quantiplex HYres Kit (200)
Reaction Mix FQ, Primer Mix IC YQ, Control DNA Z1, QuantiTect Nucleic Acid Dilution Buffer
387116
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The Investigator Quantiplex HYres Kit is intended for molecular biology applications in forensic, human identity, and paternity testing. This product is not intended for diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
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The Investigator Quantiplex Kit retains excellent sensitivity down to 1 pg/µl.|Excellent reaction time.|No copy-number variation in the human target.|Scorpions primers and their function.|
Control DNA Z1 was diluted to 0.3 pg/μl and quantified using the Investigator Quantiplex Kit in 2 independent runs.|The Investigator Quantiplex HYres Kit yields results in 51 minutes on the Rotor-Gene Q and 62 minutes on the Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Cycler. This is significantly faster than kits from other suppliers.|The human genetic target of the Investigator Quantiplex HYres Kit is highly conserved and does not vary across ethnicity. The change in threshold cycle between the two targets is shown across populations. n equals the number of individuals in the test group.||
Performance

对Investigator Quantiplex HYres Kit的验证显示,在法医检材样本和人类身份鉴定测试中,在正常范围内的条件下,可获得稳定可重复的结果。该试剂相对于其他供应商的同类试剂而言能确保更快速的PCR,仅需51分钟即可在QIAGEN的Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上获得结果(参见"Excellent reaction time")。这是一个既节省时间又节省花费的工作流程。

验证Investigator Quantiplex HYres Kit的标记物,并且检测得到不同性别或不同族群之间的拷贝数无差异,确保了该标记物是理想的real-time PCR靶标,用于DNA定量检测(参见"No copy-number variation in the human target")。

该试剂盒能够定量宽范围的DNA的量,从50 ng/µl到0.5 pg/µl,对人类基因组DNA在20 ng/µl和4.9 pg/μl内有良好的线性契合度。此外,检测确保灵敏度1 pg/µl以下(参见"Excellent sensitivity down to <1 pg/μl")。

Principle

人类身份鉴定通常基于对短串联重复序列(STRs),单核苷酸多态性(SNPs)或删除插入多态性(DIPs)的分析,取决于检查需求或对样本品质的要求。 这些多重检测是复杂的体系,需要确定的模板输入范围。

Investigator Quantiplex HYres Kit包含试剂和DNA聚合酶,用于特异扩增2个靶向区域并用于在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪或Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR Systems上直接检测特异的PCR产物。人类总DNA的靶点是人类基因组146 bp的常染色体多拷贝区。选择独特的多拷贝区确保在不同性别和种群内高灵敏度和高可靠性。使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪的绿色通道或Applied Biosystems仪器上的FAM染料通道对目标进行检测。

人类男性定量DNA区域的选择也需要确保在不同性别和种族内混合DNA样本有相同的高灵敏度和高可靠性。该靶标区域是长为129 bp的片段,使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪的红色通道或Applied Biosystems仪器上的Cyanine 670染料通道进行检测。 

此外,Investigator Quantiplex HYres Kit包含平衡的内部扩增控制子,用于测试扩增是否成功以及是否含有PCR抑制剂。此类异源扩增体系是长为200 bp的内参(IC),使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪的黄色通道内或Applied Biosystems仪器的VIC染料通道检测。

使用Scorpion引物和创新、快速的PCR试剂对扩增进行检测。Scorpion引物是双功能分子含有PCR引物共价连接探针(参见"Scorpion primers and their function")。探针中的荧光基团与淬灭基团相互作用,同时嵌入探针内,以降低荧光。在PCR过程中,当探针与扩增子结合,荧光基团与淬灭基团分开。这导致反应管中的荧光性增强。

反应试剂经仔细优化以进一步支持快速的反应机制。专为人类身份鉴定研发的创新PCR试剂和酶,确保了高灵敏度和速度。此外,独特研发的PCR试剂包含专利添加剂Q-Bond,显著地减少了变性、退火和延伸时间。

Procedure

该试剂盒是即用型体系,通过real-time PCR定量检测人类DNA。参见下表“技术规格”以获得更多信息。已开发一套模板文件,以简化仪器设置和在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上分析结果(参见"Template files available for the Rotor-Gene Q")。

技术规格
每个PCR反应的体积 20 µl
DNA模板的体积 2 µl
靶标 人类特异性基因DNA多拷贝靶标
人类男性特异性基因DNA多拷贝靶标
Real-time循环仪 Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪、Applied Biosystems 7500 Real-Time System或Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time System
用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪的模板文件
模板文件 目的
Investigator Quantiplex HYres Kit Cycling 预设循环方案
Investigator Quantiplex HYres Kit Sample 样本名称、样本类型和标准曲线和内参的浓度
Investigator Quantiplex Kit HYres Analysis Settings for the Yellow Channel CT设置
Applications

Investigator Quantiplex HYres Kit用于定量人和人类男性DNA,并且确定是否存在PCR抑制剂以及是否需要进一步的样本纯化。其适用于:

  • 法医数据库和案件样本
  • 亲子鉴定样本
  • 性侵犯样本
  • 灾难受害者身份鉴定和人类学研究
  • 其他人类身份鉴定测试应用

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Kit Handbooks
1
For quantification of human and male DNA in forensic samples
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