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EpiTect Control DNA and Control DNA Set

甲基化分析中用作实验对照
  • 使用便利、经严格质量控制的即用型DNA溶液
  • 亚硫酸氢盐转化的DNA,用于对照实验
  • 适用于各种甲基化分析

EpiTect Control DNAs是即用型、完全甲基化或非甲基化经亚硫酸氢盐转化的DNA,以及未处理的非甲基化基因组DNA,为甲基化分析设立标准可靠的对照反应。甲基化或未甲基化的亚硫酸氢盐转化DNA储存在EB Buffer(10 mM Tris·Cl)中,是浓度为10 ng/μl的即用型溶液。未转化的非甲基化人类对照DNA也储存在EB Buffer(10 mM Tris·Cl)中,是浓度为50 ng/μl的即用型溶液。

Cat No./ID: 59568
EpiTect Control DNA (1000)
Unmethylated human control DNA for 1000 control PCRs
Cat No./ID: 59655
EpiTect Control DNA, methylated (100)
Methylated and bisulfite converted human control DNA for 100 control PCRs
Cat No./ID: 59665
EpiTect Control DNA, unmethlyated (100)
Unmethylated and bisulfite converted human control DNA for 100 control PCRs
Cat No./ID: 59695
EpiTect PCR Control DNA Set (100)
Human control DNA set (containing both bisulfite converted methylated and unmethylated DNA and unconverted unmethylated DNA) for 100 control PCRs

EpiTect Control DNA and Control DNA Set适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
Real-time PCR标准品。
将EpiTect Methylated Control DNA和EpiTect Unmethylated Control DNA混合,得到100%、90%、50%、10%和0%的甲基化DNA。使用EpiTect MethyLight Assays对人PITX2基因进行三次重复分析,每个DNA样本取10 ng。结果表明,EpiTect Control DNA可用作未知DNA样本定量的甲基化标准品。
1
HRM定量标准品。
扩增APC基因(结肠腺瘤息肉)启动子区域的CpG岛,使用EpiTect HRM PCR Kit在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上通过HRM甲基化分析确定甲基化程度。EpiTect Control DNA Set中甲基化和未甲基化DNA按不同比例混合,作为分析模板。
2
EpiTect Control DNA Pyrogram。
对MGMT启动子的16个CpG进行完全甲基化(甲基化比率>95%)或完全未甲基化(平均甲基化率0.3%)检测。在PyroMark Q96 ID仪器上对MGMT的PCR产物进行焦磷酸测序,MGMT是参与DNA修复和抗药性的p53相关基因。(数据由Uwe Gerstenmaier, Varionostic GmbH, Ulm提供)。
4
对WBA DNA进行EpiTYPER MALDI-TOF分析。
对未甲基化DNA(UMDNA 1)、甲基化DNA(VIAL A 1)和二者混合物(HTXA 1),在使用EpiTect Whole Bisulfitome Kit扩增前后(WBAUMDNA1, WBAHTXA 1, WBAVIAL A 1)进行MP6位点的甲基化检测。扩增前的甲基化模式与扩增后的DNA非常类似,说明是有扩增的位点全面。(数据由美国Hany Ezzeldin, Mayo Clinic, Rochester提供)。
Performance
EpiTect Control DNAs非常适合作为基于探针的real-time PCR甲基化分析的定量标准(参见"Real-time PCR standards") 和用于HRM甲基化分析(参见"HRM quantification standards")。 
Principle
EpiTect Control DNA Set包含所有为甲基化分析设立标准可靠的对照反应的对照DNA。例如:在甲基化特异性PCR中,对照反应必须确保PCR探针和引物特异性结合甲基化或非甲基化DNA(参见"Use of EpiTect Control DNA in PCR for methylation analysis")。这些反应需要不同浓度的完全被亚硫酸氢盐转化的对照DNA,而这些DNA全部甲基化或全部非甲基化(参见"EpiTect Control DNA Pyrogram"和"EpiTYPER MALDI-TOF analysis of WBA DNA")。此外,混合的对照DNAs可做为定量标准,用于在HRM和基于探针的甲基化实验中确定甲基化水平。 
Procedure
表观遗传学中标准的工作流程

表观遗传学信息不仅在生物和医学研究领域,尤其肿瘤学研究中是非常重要的,而且对干细胞研究和生物学的发展也至关重要。由于缺乏从有限样本中获得可重复数据的标准方法,分析DNA甲基化变化仍是一个难题。配合其新引进的EpiTect溶液,QIAGEN提供标准的分析前和分析溶液,用于从DNA样本收集、稳定和纯化到亚硫酸氢盐转化和real-time或终点PCR甲基化分析或测序(参见"Standardized workflows in epigenetics")。

Applications

EpiTect Control DNAs适用于各种甲基化分析的对照反应,包括:

评估MSP引物的特异性
作为HRM和MethyLight PCR的定量标准
评估MethyLight PCR引物和探针的特异性
确定亚硫酸氢盐转化反应的效率
Features
Specifications
应用 End point Methylation Specific PCR (MSP), real-time methylation specific PCR
浓度 10 ng/µl (1 µg in total) excepted the unmethylated control DNA: 50 ng/µl (10 µg in total)
反应次数 for 1000 control PCRs

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