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EpiTect ChIP OneDay Kit

用于快速、高效染色质免疫共沉淀

  • 从细胞中免疫共沉淀DNA少于6小时
  • 高产量、高品质的DNA,以获得准确的结果
  • 与ChIP级抗体配合使用
  • 适合real-time PCR分析和可重现性沉淀

EpiTect ChIP OneDay Kit与ChIP级抗体配合使用在6小时内完成染色质免疫共沉淀(ChIP)。

Cat No./ID: 334471
EpiTect ChIP OneDay Kit (12)
ChampionChIP One-Day Kit

EpiTect ChIP OneDay Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
高度可重复性。
4位独立的研究者采集了两百万个HCT116细胞的重复样本。每个人都使用EpiTect ChIP Antibody Kit中的RNA Polymerase II抗体(RNA Pol II或对照IgG进行ChIP实验。使用EpiTect ChIP qPCR Assay对特异性富集的ChIP DNA进行GAPDH最近启动子分析。结果展示为输入结果百分比(表格)、平均值(图轴y)和标准偏差(误差棒)。多个研究者的ChIP-qPCR of Pol II结果保持一致,只有4.8%的变异系数。
1
信噪比佳。
甲醛固定HCT-116细胞的三个孔。使用EpiTect ChIP OneDay Kit进行染色质免疫共沉淀。纯化富集的基因组DNA,使用EpiTect ChIP qPCR Assays分析GAPDH最近启动子区域和作为阴性对照的ORF-free区域。结果显示为起始样本量的百分比,或总DNA量中与RNA Polymerase II免疫共沉淀的部分。
2
EpiTect ChIP OneDay实验方案。
3
DNA不含PCR抑制剂。
从四百万个未处理的HeLa细胞中分离染色质并超声。从加入的DNA组分(菱形)中纯化DNA,使用EpiTect ChIP OneDay Kit将DNA与对照IgG(三角形)、anti-p53 (p53 IP,正方形)或RNA Polymerase II(Pol2 IP,圆形)。每个DNA制品取不同量(1.0、2.0和4.0 µl),得到CT值和校正曲线。直线表明DNA中无抑制剂,不会影响real-time PCR。结果还表明使用EpiTect ChIP OneDay Kit富集的可靠性,因为富集程度与进行免疫沉淀的DNA模板量无关。
Performance
EpiTect ChIP OneDay Kit能分离出高产量、高纯度的DNA,不受抑制剂影响。因此,进行real-time PCR分析得到高度可重复性结果和良好的信噪比(参见"A high degree of reproducibility"、"Good signal-to-noise ratios"和"DNA free from PCR inhibitors")。
Principle

EpiTect ChIP OneDay Kit使用特异性抗体沉淀体内与转录因子、经修饰的组蛋白及其他的目标核因子结合的基因组DNA片段,以完成染色质免疫共沉淀。

EpiTect ChIP OneDay Kit将交联逆转和DNA分离时间减少到1小时,而传统的ChIP方法需要6–8小时。节省的时间允许在免疫共沉淀之前对剪接的染色质大小进行质量控制和评估,保证了随后进行的real-time PCR检测的可靠性。

该试剂盒只需6小时就能获得高产量的浓缩ChIP DNA,不受抑制剂的影响,可即用于real-time PCR定量分析(参见"EpiTect ChIP OneDay protocol")。除交联试剂和抗体外,该试剂盒包括了所有ChIP制备过程所需的缓冲液和试剂。

Procedure

用EpiTect ChIP One Day Kit将细胞、组织中的染色质剪接,然后与EpiTect ChIP Antibody Kit或其他来源中的ChIP级抗体进行孵育和免疫共沉淀。这些抗体能使染色质与目标蛋白共沉淀。使用EpiTect ChIP OneDay Kit对ChIP DNA片段纯化后,使用EpiTect ChIP qPCR Assays或EpiTect ChIP qPCR Arrays对目标抗体所沉淀的DNA进行real-time PCR定量。

Applications

EpiTect ChIP OneDay Kit与EpiTect ChIP Antibody Kit和EpiTect ChIP qPCR Arrays Arrays可配合用于以下领域:

  • 识别疾病生物标记物
  • 表征信号转导通路
  • 检查转录调控
  • 检测表观遗传变化
  • 验证ChIP-on-chip和ChIP-Seq数据

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试剂盒操作手册 (1)
For immunoprecipitation, crosslink reversal, and DNA purification for quantitative real-time PCR analysis of chromatin immunoprecipitation
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