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NRAS Pyro Kit

基于序列定量分析NRAS基因的突变

  • 实时获得多个结果
  • 准确定量NRAS基因中的突变
  • 简便检测复杂突变
  • 序列信息提供检测的内置参照
  • 灵活的后续分析

NRAS Pyro Kit是用于鉴定NRAS基因突变的分子检测试剂盒。该试剂盒包含扩增NRAS基因所需的引物和试剂、外加缓冲液、引物和试剂,在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术实时定量检测突变。

Cat No./ID: 970530
NRAS Pyro Kit (24)
For 24 reactions: Sequencing Primers, PCR Primers, Unmethylated Control DNA, PyroMark PCR Master Mix, CoralLoad Concentrate, Buffers, and Reagents

NRAS Pyro Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
密码子12-13正常基因型的Pyrogram。
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NRAS分析原理。
The sequence indicated is the analyzed sequence for a normal sample. FP: Forward PCR primers; RPB: Reverse PCR primers (B indicates biotinylation); Seq: Sequencing primers.
2
Pyrogram trace of a GGT to AGT mutation in base 1 of codon 12.
The Pyrogram shows the mutation (nucleotide 34, indicated with an arrow) with the "Sequence to Analyze" GNTGNTGTTGGGAAAAGC targeting base 2 in codon 12 (nucleotide 35). A red color indicates that this sequence is unexpected and needs to be checked.
3
Pyrogram trace of the reanalysis of the sample in the previous figure.
The mutation GGT to AGT was reanalyzed with the "Sequence to Analyze" NGTNGTGTTGGGAAAAGC targeting base 1 in codon 12 (nucleotide 34).
Principle

NRAS Pyro Kit用于实时定量检测人NRAS基因编码子12、13和61的突变,在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术检测。NRAS基因编码一种GTPase,该GTPase是成神经细胞瘤RAS病毒(v-ras)原癌基因同源物。在所有恶性黑素瘤中,有将近13–25%发生NRAS突变,通常是编码子12、13和61的突变。这些突变影响NRAS信号通路的活性。

可检测以下种类的突变:

编码子12/13:G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G13A、G13C、G13D、G13R、G13S和G13V
编码子61:Q61E、Q61H、Q61K、Q61L、Q61P和Q61R
Procedure
该试剂盒包含2部分实验:一个用于检测编码子12和13的突变;另一个用于检测编码子61的突变(参见"Illustration of the NRAS assay"和"Pyrogram trace of a normal genotype in codon 12–13")。运用PCR技术对这两个片段分别进行扩增,测定特定区域的核酸序列。使用该法进行定量和定性分析时,特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。

使用针对编码子12/13和编码子61的引物对两个片段PCR扩增后,将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24 System上设置程序和运行程序对样品进行分析。运行后可以通过调节"Sequence to Analyze"来检测稀有突变(参见"Pyrogram trace of a GGT to AGT mutation in base 1 of codon 12"和"Pyrogram trace of the reanalysis of the sample in the previous figure")。

Applications

NRAS Pyro Kit用于检测人NRAS基因编码子12、13和61的突变。该试剂盒确保准确的定量突变分析,适用于各种研究领域,包括癌症和表观遗传学研究。

可检测以下种类的突变:

编码子12/13:G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G13A、G13C、G13D、G13R、G13S和G13V
编码子61:Q61E、Q61H、Q61K、Q61L、Q61P和Q61R