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MGMT Pyro Kit

用于定量检测人类MGMT基因的甲基化

  • 定量检测甲基化
  • 实时获得全面结果
  • 便利的解读复杂的序列信息
  • 序列信息提供检测的内置参照
  • 灵活的后续分析

MGMT Pyro Kit用于定量检测人类MGMT基因外显子1的4个CpG位点的甲基化。该试剂盒包含扩增该基因所需的引物和试剂,以及在PyroMark Q24上使用焦磷酸测序技术实时定量检测甲基化所需的缓冲液、引物和试剂。

Cat No./ID: 970061
MGMT Pyro Kit (48)
MGMT Pyro Kit 用于分子生物研究。该产品不用于诊断、预防、治疗疾病或为其提供信息。
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人脑胶质瘤样本的非甲基化DNA。
人脑胶质瘤未甲基化的亚硫酸氢盐转化DNA的Pyrogram图。数字15处的柱形为对照(完全亚硫酸氢盐转化)。
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高度甲基化的对照DNA。
高度甲基化的DNA的Pyrogram图。数字15处的柱形为对照(完全亚硫酸氢盐转化)。
2
人脑胶质瘤样本的甲基化DNA。
人脑胶质瘤亚硫酸氢盐转化的甲基化DNA的Pyrogram图。数字15处的柱形为对照(完全亚硫酸氢盐转化)。
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MGMT试剂原理图示。
图示序列是亚硫酸氢盐转化的待分析序列。Y表示潜在的甲基化位点,框表示待分析的CpG位点。星号表示该位点为亚硫酸盐转化对照。FP:正向PCR引物;RPB:逆向PCR引物(B表示生物素化);Seq:测序引物。
Principle
MGMT Pyro Kit用于检测人MGMT基因(10号染色体上从131、265、519到131、265、537:CGACGCCCGCAGGTCCTCG的基因序列)外显子1的4个CpG位点的甲基化,在PyroMark Q24 System上使用焦磷酸测序技术实时定量检测甲基化。MGMT(O(6)-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶)基因编码用于修复烷基化DNA的酶,该酶通过去除鸟嘌呤O6的甲基来修复烷基化DNA。MGMT基因甲基化增加会抑制该基因的表达,降低DNA的修复功能。在多数癌症中,包括脑癌、结肠癌、肺癌和乳腺癌,有25–50%的MGMT基因发生甲基化。
Procedure
运用PCR技术对亚硫酸盐转化的基因组DNA进行扩增,测定特定区域的核酸序列(参见"Illustration of MGMT assay")。使用该法进行定量和定性分析时,特定区域周围的核酸序列峰被视为标准峰和参照峰。

使用针对外显子1的引物对片段PCR扩增后,将扩增子固定在高性能链霉素亲和琼脂糖上。将单链DNA和相应序列的引物退火处理得到DNA。然后在PyroMark Q24 System上对样品进行分析(参见"Unmethylated DNA from a human glioblastoma sample","Methylated DNA from a human glioblastoma sample"和"Highly methylated control DNA")。

Applications

MGMT Pyro Kit用于定量检测人类MGMT基因(10号染色体上从131、265、519到131、265、537:CGACGCCCGCAGGTCCTCG的基因序列)外显子1的4个CpG位点的甲基化。

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