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mericon Quant MON 810 Kit

采用real-time PCR,定量检测食品中的MON 810玉米
  • 可高灵敏度、特异性定量检测MON 810玉米
  • 统一的PCR反应实验方案获得的结果具有可对比性
  • 在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上自动运行约82分钟
  • 专用的样本制备试剂盒,是完整工作流程的一部分
  • 有PCR认证,无需额外的花费
mericon Quant MON 810 Corn Kit适用于定量性检测食品、饲料及药品中的MON 810玉米。该试剂盒使用基于PCR的实验方案,是QIAGEN丰富的食品检测产品线中的一部分,此外还有专门用于成分鉴定及病原体检测的样品制备及分析试剂盒。mericon Quant MON 810 Corn Kit在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上具有出色表现,经验证也可用于其他PCR仪。
Cat No./ID: 291524
mericon Quant MON 810 Kit (48)
For 48 reactions: PCR Assay MON 810, Internal Control, PCR Assay Reference System, Quantification Control DNA, Standard DNA, Multiplex PCR Master Mix, QuantiTect Nucleic Acid Dilution Buffer, RNase-Free Water, 50x ROX Dye Solution
mericon Quant MON 810 Kit适用于食品、动物饲料和药品检测领域的分子生物学应用。该产品不可用于疾病的诊断、预防或治疗。
Performance

mericon Quant MON 810玉米 Kit适用于特异性定量检测食品、饲料中的MON 810玉米DNA。GMO MON 810检测试剂和(玉米)参比检测试剂都可检测到低至10个拷贝的靶DNA。

PCR Assay MON 810在检测MON 810玉米DNA时具有高度特异性。使用50 ng待测DNA与其他含有或不含该重组基因的动植物样本进行交叉反应检测,结果皆为阴性(参见下表"mericon Quant MON 810玉米 Kit交叉反应研究结果")。

mericon Quant MON 810玉米 Kit交叉反应研究结果

物种、转基因生物或重组基因 结果 物种、转基因生物或重组基因 结果
MON810玉米 + EH92-527土豆
Bt176玉米 H7-1甜菜
Bt11玉米 大豆
MIR604玉米 大麦
3272玉米 土豆
NK603玉米 大米
MON863玉米 小麦
TC1507玉米 黑麦
59122玉米
98140玉米
Roundup Ready大豆 绵羊
305423大豆 山羊
356043大豆

参比检测试剂(Reference System Assay,玉米)在检测玉米和MON 810玉米时具有高度特异性。使用50 ng待测DNA与其他含有或不含该重组基因的动植物样本进行交叉反应检测,结果皆为阴性(参见下表“Reference System Assay交叉反应研究结果”)。

Reference System Assay交叉反应研究结果

物种 结果 物种 结果
玉米 + 绵羊
大豆 山羊
油菜
大米 榛子
土豆 山核桃
大麦 山核桃
小麦 杏仁
黑麦 芥菜
羽扇豆
Principle

mericon Quant MON 810 Corn Kit能够定量检测食品和动物饲料样本中的MON 810玉米成分(世界上最常见的转基因玉米品种)。MON 810玉米经过基因修饰,因此能够产生苏云金芽孢杆菌的毒素,对欧洲玉米螟(strinia nubilalis)有抗性。

PCR方法检测转基因生物DNA是基于对该转基因生物的重组基因进行扩增。real-time PCR时,通过特异性荧光染料检测扩增产物。PCR产物增多的同时,结合的探针会释放出越来越多的荧光信号。在PCR反应中监测荧光强度,即可实时监测到产物生成量,而无需打开管盖。

mericon PCR Assays的探针是序列特异性寡核苷酸,在探针5'端有荧光基团,3'端有淬灭基团。在PCR的延伸阶段,如果DNA目标序列存在,探针在HotStarTaq Plus DNA Polymerase的5'→3'外切酶活性作用下被剪切。荧光基团和淬灭基团分离,生成可检测的荧光信号,与PCR产物的生成量成比例。

依据GMO PCR和参比PCR的结果,对目标转基因生物进行定量。GMO检测试剂靶向待测转基因生物的某一常用重组基因,或某一转基因生物(例如Roundup Ready大豆)的特异性DNA序列。参比检测试剂靶向该转基因植物的物种(例如大豆)。两个PCR的标准曲线是定量检测的基础。标准曲线是通过检测DNA标准品特定浓度的稀释液获得的,这些稀释液中的GMO和参比DNA的浓度是特定的。

mericon Quant Assay含有为GMO和物种特异(参比体系)的靶序列优化的PCR引物混合液,以及内参(IC)、标记有荧光染料(在两个检测体系中,受测样本都通过FAM报告基团(495/520 nm)检测,内参通过MAX NHS Ester报告基团(MAX; 524/557 nm)检测)的探针。此外,试剂盒还含有Quantification Control DNA和Standard DNA,以及实验所需的所有试剂。

Procedure

使用相应的样本制备试剂盒从食品或动物饲料中提取DNA。QIAGEN的DNeasy mericon Food Kit适用于检测一系列食物样本,包括那些抑制剂含量高的食物。

分离出的纯DNA在QIAGEN的Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行高效的real-time PCR分析,82分钟即可获得结果。此实验方案被证实也可用于其他板式热循环仪。

结果用简明PCR曲线表示。

Applications
mericon Quant MON 810 Corn Kit采用real-time PCR技术,定量性检测食品、饲料及药品中的MON 810玉米。
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