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mericon E. coli O157 Detection Kits

采用real-time PCR方法,检测食品及饲料中的大肠杆菌O157和O157:H7血清型
  • 用Screen Plus Kit筛查大肠杆菌O157血清型和大肠杆菌致病基因
  • 用STEC O-Type Kit检测O157:H7血清型,并与其他韩STEC的大肠杆菌区分
  • 包含内参,确保检测成功
  • 在用STEC O-Type Kit检测前,用Screen Plus Kit筛查致病基因
mericon E. coli O157 Screen Plus Kit专用于定量检测大肠杆菌O157血清型和大肠杆菌致病基因intimin (eae)、以及志贺毒素样蛋白(stx1stx2)。如果存在eaestx1/stx2 ,则需进一步分辨是大肠杆菌O157血清型、还是非O157的O血清型(O26, O45, O103, O111, O121, 和O145)。因此后续检测可使用mericon E. coli STEC O-Type Kit。
Cat No./ID: 290233
mericon E. coli STEC O-Type Kit (24)
For 24 reactions: PCR Assay E. coli O157 STEC O-Type, Internal Control, Multiplex PCR Master Mix, RNase-Free Water
Cat No./ID: 290403
mericon E. coli O157 Screen Plus Kit (24)
For 24 reactions: PCR Assay E. coli O157 Screen Plus, Internal Control, Multiplex PCR Master Mix, RNase-Free Water
Cat No./ID: 290405
mericon E. coli O157 Screen Plus Kit (96)
For 96 reactions: PCR Assay E. coli O157 Screen Plus, Internal Control, Multiplex PCR Master Mix, RNase-Free Water
mericon E. coli O157 Detection Kit适用于食品、动物饲料和制药产品的分子生物学检测。该产品不可用于疾病的诊断、治疗或预防。
Performance

mericon E. coli Screen Plus Kit专用于定量检测大肠杆菌O157血清型和大肠杆菌致病基因intimin (eae)、以及志贺毒素样蛋白(stx1stx2)。如果存在eaestx1/stx2 ,则需进一步分辨是大肠杆菌O157血清型、还是非O157的O血清型(O26, O45, O103, O111, O121, 和O145)。该试剂盒可检测低至10拷贝的大肠杆菌靶DNA,具有高度特异性。使用2500个拷贝的待测DNA与其他病原体样本进行交叉反应分析,结果皆为阴性(参见下表)。

mericon E. coli STEC O-Type Kit能够高度特异性的检测大肠杆菌O157:H7, O26, O45, O103, O111, O121,和O145血清型。使用该试剂盒检测各种大肠杆菌O157:H7血清型和非O157:H7血清型菌株,以及其他大肠杆菌和非大肠杆菌俊虎。所有被测O157:H7血清型和非O157:H7血清型菌株都被成功检出,并且无交叉反应(参见下表2)

mericon E. coli O157 Screen Plus Kit交叉反应研究结果
病原体/基因 结果 病原体/基因 结果
eae + Enterobacter sakazakii
E. coli O157:H7 + Escherichia coli O6
VTEC stx1 + Listeria monocytogenes
VTEC stx2 + Shigella flexneri
Bacillus cereus Staphylococcus aureus
Camplyobacter jejuni Yersinia enterocolitica
Clostridium perfringens
mericon E. coli STEC O-Type Kit交叉反应研究结果
病原体 
Strain no.
结果
Orange channel
结果
Green channel
E. coli O26:H–
DSM 8695
+
E. coli O45
SSI 81886
+
E. coli O103
NC09103
+
E. coli O103
SSI 82109
+
E. coli O111:H–
DSM 8698
+
E. coli O111:H–
DSM 10234
+
E. coli O121
NC09121
+
E. coli O145
SSI 82280
+
E. coli O157:H7
DSM 8579
+
E. coli O157:H7
DSM 13526
+
E. coli O157:H7
DSM 17076
+
E. coli O157:H7
DSM 19206
+
E. coli O1:H7
DSM 30083
E. coli O1:K1:H7
ATCC11775
E. coli O1:K1:H7
DSM 10750
E. coli O2:K1:H4
DSM 10777
E. coli O7:K1:H7
DSM 10858
E. coli O11:H10
DSM 11751
E. coli O12:H2
DSM 8703
E. coli O13:H11
DSM 1058
E. coli O18ac:K1:H7
DSM 10723
E. coli O19:H7
DSM 11752
E. coli O25:H4
DSM 22664
E. coli O29:H10
DSM 9026
E. coli O104
NC09104
E. coli O107:H5
DSM 9033
E. coli O112ac:H– DSM 9027
E. coli O113
SSI 82121
E. coli O124:H30
DSM 9031
E. coli O126:H2
DSM 8701
E. coli O143:H–
DSM 9028
E. coli RM-HYG118
VTEC isolate
E. coli RM-HYG119
VTEC isolate
E. coli RM-HYG120
VTEC isolate
Bacillus cereus
ATCC 11778
Campylobacter jejuni
ATCC 33560
Clostridium perfringens
ATCC 13124
Enterobacter sakazakii
DSM 4485
Escherichia coli
ATCC
Escherichia coli
NCTC 9002
Legionella erythra
Sifin
Listeria monocytogenes
ATCC 7644
Shigella flexneri
ATCC 12022
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
Vibrio vulnificus
ATCC 43478
Yersinia enterocolitica
ATCC 9610
Principle

依据美国牛肉业的相关国家法规,如USDA FSIS规定,所有非完整产品(如碎牛肉)在进入供应链销售前,必须或应该进行检测,确定其是否含有产志贺毒素的大肠杆菌(STEC)的6个株系。

mericon大肠杆菌检测工作流程提供完整的STEC筛查和检测,适用于多种食品。该试剂盒适用于Rotor-Gene Q 5plex、Rotor-Gene Q 5plex HRM和Rotor-Gene Q 6plex平台。这一解决方案可检测STEC的6大株系和E. coli O157:H7。第一步,使用mericon E. coli O157 Screen Plus Kit筛查阳性样本。第二步使用mericon E. coli STEC O-Type Kit鉴定O157:H7血清型,并与其他非O157 O血清型菌株进行区别。

mericon E. coli O157 Screen Plus Kit专用于定量检测大肠杆菌O157血清型和大肠杆菌致病基因intimin (eae)、以及志贺毒素样蛋白(stx1stx2)。如果存在eaestx1/stx2 ,则需进一步分辨是大肠杆菌O157血清型、还是非O157的O血清型(O26, O45, O103, O111, O121, 和O145)。利用该试剂盒能够决定决定是否要进行后续检测,结果会在表格中显示(参见下表)。

mericon E. coli O157 Screen Plus Kit结果解读
编号 Orange
O157
Green
stx1/stx2
Crimson
eae
Yellow
IC
下一步
1 有效 无需后续检测
2 + 有效 无需后续检测
3 + 有效 无需后续检测
4 + 有效 需要进一步检测
5 + + 有效 需要进一步检测
6 + + + 有效 需要进一步检测
7 无效 稀释样本,重复检测

之后使用mericon E. coli STEC O-Type Kit进一步检测,结果可便利的解读,总结如下表所示。

mericon E. coli STEC O-Type Kit结果解读
编号  O157:H7
Orange channel
Non-O157:H7 serotypes
Green channel
IC
Yellow channel
下一步
1 有效 无需后续检测
2 + 有效 需要进一步检测
3 + 有效 需要进一步检测
4 + + 有效 需要进一步检测
5 无效 稀释样本,重复检测

real-time PCR检测该致病菌是基于扩增其基因组的某一特定区域。通过特异性荧光染料检测扩增产物。PCR产物增多的同时,结合的探针会释放出越来越多的荧光信号。在PCR反应中监测荧光强度,即可实时监测到产物生成量,而无需打开管盖。

mericon PCR Assays含有内参,能够检测PCR反应是否被抑制。内参有助于结果的解读(参见上表)。每个试剂盒的PCR引物具有高度特异性,靶向该致病菌的一段保守DNA序列,已经过生物信息学验证和实验验证。 
Procedure
使用相应的样本制备试剂盒从富集的食品或动物饲料样本中提取DNA。推荐使用mericon Bacteria Kit或QIAsymphony mericon Bacteria Kit从革兰氏阴性菌中分离细菌DNA。

分离出的纯DNA在QIAGEN的Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上进行高效的real-time PCR分析,73分钟即可获得结果。

结果用简明PCR曲线表示。
Applications
mericon E. coli检测流程提供完整的STEC筛查和确定方案,可用于多种食品。该试剂盒可在QIAGEN Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR仪上使用,包括Rotor-Gene Q 5plex、Rotor-Gene Q 5plex HRM和Rotor-Gene Q 6plex。该方案能够检测6种常见的STEC、以及大肠杆菌O157:H7血清型。工作流程的第一步是筛查阳性样本,使用mericon E. coli O157 Screen Plus Kit。第二步使用mericon E. coli STEC O-Type Kit确定大肠杆菌O157:H7血清型,并鉴定其是否是其他非O157 O血清型菌株。
Features
Specifications
定量/定性 Qualitative
推荐的样本制备 mericon DNA Bacteria Kit or QIAsymphony mericon DNA Bacteria Kit (Gram-negative bacteria)
仅限科研使用/CE认证/ASR RUO
样本类型 Bacterial preculture from food
热循环仪 Rotor-Gene Q 5plex, 5plex HRM, or 6plex
可检测 DNA of respective pathogen

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模板文件 (2)
Rotor-Gene Q template files for starting and analyzing PCR runs
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Rotor-Gene Q template files for starting and analyzing PCR runs
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