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virotype PRRSV RT-PCR Kit

用于检测猪样本中PRRSV的RNA
  • 同时检测PRRSV的欧洲型和北美型
  • 区分高度致病性的PRRSV HP株系
  • 易用性反应混合液含有对照
  • 2小时内获完成RT-PCR
virotype PRRSV RT-PCR Kit能够安全的检测猪样本中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的欧洲型(EU)和北美型(NA)。该试剂盒也能区分NA型的HP株系。该试剂盒含有多重real-time RT-PCR一次反应的即用型预混液所需的所有试剂。适用样本包括5个猪的血液、血清、组织、支气管拭子、支气管灌洗液、唾液和精液样本的混合液、细胞培养液上清和唾液集合样本。

virotype PRRSV RT-PCR Kit只适用于兽医学检测。以上信息不适用于疾病的诊断、预防或治疗。上述试剂盒、试剂和检测方法已经过德国Friedrich-Loeffler-Institute审批,可用于兽医学检测。

在德国依据德国动物疫病法§17c已注册。注册号:FLI-B 562
Cat No./ID: 282303
virotype PRRSV RT-PCR Kit (24)
For 24 reactions: PRRSV Mix, Positive Control, Negative Control
Cat No./ID: 282305
virotype PRRSV RT-PCR Kit (96)
For 96 reactions: PRRSV Mix, Positive Control, Negative Control
virotype PRRSV RT-PCR Kit只适用于兽医学检测。以上信息不适用于疾病的诊断、预防或治疗。上述试剂盒、试剂和检测方法已经过德国Friedrich-Loeffler-Institute审批,可用于兽医学检测。

在德国依据德国动物疫病法§17c已注册。注册号:FLI-B 562
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灵敏检测PRRSV。
使用virotype PRRSV RT-PCR Kit,对十倍梯度稀释的PRRSV EU1、EU2、NA和HP(108至10拷贝/孔)重复进行三次real-time RT-PCR反应。
Performance
virotype PRRSV RT-PCR Kit能够检测猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA。使用virotype PRRSV RT-PCR Kit对384个已知PRRSV感染情况的样本(129个阳性样本和255个阴性样本,由Friedrich-Loeffler-Institute、州实验室和私人实验室提供)进行了验证实验。在129个阳性样本中,123个样本检测为阳性,检测特异性高于95%。所有阴性样本检测结果都为阴性,检测特异性为100%。此外,对十倍梯度稀释的108至10个拷贝/孔的PRRSV RNA进行检测。结果显示,在108至100个拷贝/孔的浓度范围内,病毒RNA拷贝数和扩增产物之间具有高度相关性(99%);能够对低达10拷贝/孔的病毒RNA进行灵敏检测(参见“灵敏检测PRRSV”)。将该试剂盒的分析灵敏度与另外两种市售试剂盒进行对比。使用这三种试剂盒检测12个PRRSV的参比RNA样本(由Friedrich-Loeffler-Institute的Bernd Hoffmann博士提供)。virotype PRRSV RT-PCR Kit的结果与供应商A的试剂盒的结果相当,二者比供应商B的结果更灵敏(参见“分析灵敏度对比”表)。只有virotype PRRSV RT-PCR Kit能够检测到高度致病性(HP)的NA基因型。 

分析灵敏度对比
试剂盒 virotype PRRSV RT-PCR Kit 供应商A的试剂盒 供应商B的试剂盒
靶标  EU NA HP IC EU NA IC EU NA IC
欧洲型
EU Stendal V953 25.22 34.61 24.08 29.89 24.95 35.66
Intervet 22.02 33.22 19.41 28.85 24.65
Cobbelsdorf 23.86 32.65 22.20 29.32 26.02
Stendal V852 23.24 39.96 21.86 29.68 26.16 36.98
Stendal V1904 24.30 39.06 23.47 29.30 27.63 37.41
Stendal V1952/97 26.29 35.41 24.51 31.32 28.12 36.06
北美型
Stendal V1445/99 21.39 34.85 21.17 30.78 24.92 34.10
USA VD28775/2 21.35 29.14 21.61 30.40 24.07 39.08
USA VD29949/17 22.41 28.48 22.18 29.65 26.89
USA 2 19.83 30.64 20.44 30.81 23.64
USA 18 19.06 31.48 19.50 30.39 26.54
China 20.87 22.44 28.36 20.54 29.89 25.84
平均值EU 24.16 22.59 26.26
平均值NA 20.82 20.91 25.32

使用virotype PRRSV RT-PCR Kit和另外两种市售PRRSV检测试剂盒,对12个PRRSV参比株系进行real-time RT-PCR反应,重复三次。图中所示为获得的平均CT值。
Principle
这一real-time RT-PCR试剂盒能够检测猪繁殖与呼吸综合征病毒RNA。RT-PCR扩增病原体基因组的某一特定区域。是灵敏、特异性的病原体检测方法。

Real-time RT-PCR对病毒RNA进行逆转录,之后通过PCR扩增cDNA。通过荧光染料检测扩增产物。这些染料通常与扩增产物上特异性结合的寡核苷酸探针结合。在PCR反应中监测荧光强度,即可实时监测到产物生成量,而无需打开管盖。
Procedure
该试剂盒含有即用型预混液,其中有检测PRRSV RNA所需的所有试剂,以及阳性对照和阴性对照。使用该试剂盒进行检测,逆转录和PCR反应在同一单管中进行,减少了污染风险。
 
使用相应的样本制备试剂盒从样本材料(血清、血液、组织、精液、支气管拭子或灌洗液、或细胞培养液上清液)中分离RNA。将分离出的RNA用于RT-PCR反应。

该试剂盒采用四组特异性引物/探针对。每组可被不同的荧光信号通道检测,因此能够同时检测不同的PRRSV株系。
Applications
virotype PRRSV RT-PCR Kit可检测猪的血液、血清、组织、唾液、精液、支气管拭子或灌洗液、或细胞培养液上清液样本中的猪繁殖与呼吸综合征病毒。
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