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virotype CSFV RT-PCR Kit

用于检测猪样本中的传统猪瘟病毒RNA
  • 快速、特异性的检测传统猪瘟病毒的RNA
  • 易用性反应混合液含有对照
  • 2小时内获完成RT-PCR
  • 可与其他virotype RT-PCR试剂在一台PCR仪上一同进行反应
virotype CSFV RT-PCR Kit能够安全的检测猪和野猪样本中的传统猪瘟病毒(CSFV)RNA。该试剂盒含有real-time RT-PCR一次反应的即用型预混液所需的所有试剂。适用样本包括单独或混合的血清、血浆、EDTA稳定的血液和组织样本。
Cat No./ID: 281803
virotype CSFV RT-PCR Kit (24)
For 24 reactions: CSFV Mix, Positive Control, Negative Control
Cat No./ID: 281805
virotype CSFV RT-PCR Kit (96)
For 96 reactions: CSFV Mix, Positive Control, Negative Control
virotype CSFV RT-PCR Kit只适用于兽医学检测。

在德国依据德国动物疫病法§17c已注册。注册号:FLI-B 517
Performance
virotype CSFV RT-PCR Kit能够检测传统猪瘟病毒RNA。使用virotype CSFV RT-PCR Kit对553个已知CSFV感染情况的血液和组织样本(295个阳性样本和258个阴性样本;阳性样本由汉诺威欧盟CSFV参考实验室、国家CSF参考实验室、FLI Insel Riems、和州实验室提供,阴性样本由州实验室和私人实验室提供)进行了验证实验。在258个阴性样本中,1个样本检测为阳性,检测特异性大于99.5%。所有阳性样本都检测为阳性,检测特异性为100%。之后使用virotype CSFV RT-PCR Kit检测了Epizone非CSFV瘟病毒样本。所有阴性样本都检测为阴性,该组样本的检测特异性高(参见“virotype CSFV RT-PCR Kit的特异性”表)。使用virotype CSFV RT-PCR Kit和实验室内部开发的CSF-1检测方法(Hoffmann et al., 2005)检测Epizone阳性RNA样本中不同的CSFV基因型。所有样本都检测为阳性,表明该试剂盒的检测灵敏度极高。对使用virotype CSFV RT-PCR Kit和实验室内部开发的检测方法获得的CT值进行比较,virotype CSFV RT-PCR Kit具有更高的灵敏度(参见“virotype CSFV RT-PCR Kit的灵敏度”表)。

virotype CSFV RT-PCR Kit的特异性
瘟病毒RNA样本 来源 virotype CSFV RT-PCR检测结果
BDV Moredun 阴性
BDV Rudolph 阴性
BDV Gifhorn 阴性
BDV Isard 阴性
BVDV-1 NADL 阴性
BVDV-1 Paplitz 阴性
BVDV-1 PI809 阴性
BVDV-1 NC3807-1251/1 阴性
BVDV-1 Egbert 阴性
BVDV-1 BO806-17 阴性
BVDV-1 BO807-3 阴性
BVDV-1 NC3087-8757 阴性
BVDV-2 8644 阴性
BVDV-2 Bure 阴性
BVDV-2 Walter 阴性
BVDV-2 PO1600 阴性
瘟病毒 Hobi 阴性
瘟病毒 Giraffe H138 阴性

使用virotype CSFV RT-PCR Kit检测Epizone非CSFV瘟病毒样本。所有样本经检测为阴性,对该组样本的检测特异性为100%。

virotype CSFV RT-PCR Kit的灵敏度
病毒株系 基因型 virotype CSFV CT CSF-1 CT
C strain 1.1 27.45 31.21
Eystrup91 1.1 29.94 32.01
Alfort187 1.1 28.89 32.03
Koslov1128 1.2 27.98 31.64
Brescia 1.2 29.35 32.94
Scweiz II 2.1 29.34 31.07
Pader 2.1 29.66 30.94
Bergen 2.2 29.97 34.46
D4886/82/Ro 2.2 28.69 30.84
Uelzen 2.3 27.16 29.16
Spante 2.3 28.42 29.54
Congenital tremor 3.1 25.90 28.85
Kanagawa 3.4 27.25 30.65

使用virotype CSFV RT-PCR Kit检测Epizone RNA样本。所有样本都检测为阳性。virotype CSFV RT-PCR Kit只适用于兽医学检测。总体上,virotype CSFV RT-PCR Kit对受检病毒株系的检测灵敏度高于实验室内部开发的检测方法。
Principle
这一real-time RT-PCR试剂盒能够检测传统猪瘟病毒的RNA。RT-PCR扩增病原体基因组的某一特定区域。是灵敏、特异性的病原体检测方法。

Real-time RT-PCR对病毒RNA进行逆转录,之后通过PCR扩增cDNA。通过荧光染料检测扩增产物。这些染料通常与扩增产物上特异性结合的寡核苷酸探针结合。在PCR反应中监测荧光强度,即可实时监测到产物生成量,而无需打开管盖。
Procedure
该试剂盒含有即用型预混液,其中有检测CSFV RNA所需的所有试剂,以及阳性对照和阴性对照。使用该试剂盒进行检测,逆转录和PCR反应在同一单管中进行,减少了污染风险。

使用相应的样本制备试剂盒从样本材料(血清、血浆、EDTA稳定的血液和组织)中分离RNA。将分离出的RNA用于RT-PCR反应。
Applications

virotype CSFV RT-PCR Kit能够安全的检测猪和野猪血清、血浆、EDTA稳定血液和组织样本中的传统猪瘟病毒(CSFV)RNA。

参考文献:Hoffmann B, et al.(2005) Validation of a real-time RT-PCR assay for sensitive and specific detection of classical swine fever.J. Virol.Methods 130 36–44

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