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virotype ASFV PCR Kit

用于检测猪样本中的非洲猪瘟病毒DNA
  • 运用双重实时PCR对于ASFV DNA进行快速而特异的检测
  • 包含对照的易用性反应预混液
  • 2小时内即可完成PCR反应
  • 使用virotype CSFV RT-PCR便可在同一仪器内完成所有实验
virotype ASFV PCR Kit可在2小时内安全检测来源于家猪或野猪样本内的非洲猪瘟病毒DNA,实时定量PCR所需的全部试剂都包含在即用型的预混液单管中。检测样本可以是来源于家猪或野猪的血清、血浆、EDTA全血、组织或拭子。

在世界动物卫生组织(OIE)以及德国联邦动物卫生所(FLI)的推荐下,分别来源于ASFV和CSFV的DNA和RNA可以利用QIAamp Viral RNA Mini Kit进行同时抽提,也可利用QIAcube实现抽提过程的完全自动化。提取后的核酸可以进一步分别利用virotype ASFV PCR Kit和virotype CSFV RT-PCR Kit在同一仪器内进行ASFV和CSFV的检测。
Cat No./ID: 281805
virotype CSFV RT-PCR Kit (96)
For 96 reactions: CSFV Mix, Positive Control, Negative Control
Cat No./ID: 281903
virotype ASFV PCR Kit  (24)
For 24 reactions: Master Mix, Positive Control, Negative Control
Cat No./ID: 281905
virotype ASFV PCR Kit  (96)
For 96 reactions: Master Mix, Positive Control, Negative Control
The virotype ASFV PCR Kit is for veterinary use only. In Germany: Licensed in accordance with §11 of the German Animal Health Act (FLI-B 670).
Performance
QIAGEN的virotype ASFV PCR Kit可提供针对来源于家猪或野猪的血清、血浆、EDTA全血、组织或拭子样本中ASFV DNA进行高度灵敏和特异性的检测方案。

通过QIAamp Viral RNA Mini Kit和virotype CSFV RT-PCR Kit的联合使用,QIAGEN提供了全套并省时的针对ASFV和CSFV检测方案。使用virotype ASFV PCR Kit中操作步骤,或者用于ASFV DNA和CSFV RNA进行同时扩增的PCR步骤并不会影响到检测的效果质量。virotype ASFV PCR Kit的高度灵敏性确保了对于单个样本或混合样本中病原体的早期检测。

分析的灵敏度是通过对于一系列梯度浓度的体外ASFV DNA进行测定而确定的。

展示出的检测下限为10个拷贝的ASFV DNA。 

进一步的验证过程通过使用实验感染了Armenia、Sardinia以及Kenia05不同病毒株的ASFV阳性家猪及野猪样本而进行的(参见表1)。DNA分别提取自全血、脾脏、淋巴结、扁桃体、唾液腺、口咽拭子以及骨髓样本。

在检测样本的实验中,检测体系表现出了较高的灵敏度。而对于165例ASFV阴性样本的检测则得到了100%的特异性检测结果。此外,检测结果也没有发现存在同其他猪类病毒病原体的交叉反应性,如CSFV、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)以及猪圆环病毒2(PCV2)。


表1. virotype ASFV PCR Kit的高灵敏度检测
AFSV株系  物种                 感染后的天数 样本类型那个                 FLI virotype
ASFV protocol
FAM
 virotype
ASFV protocol
HEX
virotype
ASFV/CSFV protocol
FAM
 virotype
ASFV/CSFV protocol
HEX
 Sardinia      Wild boar-1  8 血液 21.10 18.99  22.59 19.86  22.45
 Sardinia  Wild boar-1  8 骨髓 21.73 19.59  22.34 19.17  22.64
 Sardinia  Wild boar-1  8 粪便 29.34 27.42  24.27 27.56  24.44
 Sardinia  Wild boar-1  8 24.01 20.62  22.20 20.42  22.50
 Sardinia  Wild boar-1  8 淋巴结 24.47 21.90  21.40 23.22  21.38
 Sardinia  Wild boar-1  8 口咽 33.40 31.09  29.10 31.20  29.37
 Sardinia  Wild boar-1  8 唾液腺 25.69 23.78  24.33 23.60  24.68
 Sardinia  Wild boar-1  8 扁桃体 23.46 21.24  21.14 21.11  21.25
 Armenia  Wild boar-2  8 血液 16.22 16.84  20.91 18.54  20.90
 Armenia  Wild boar-2  8 口咽 no CT 34.92  28.39 36.42  28.18
 Kenia05  Pig-1  14 血液 21.16 19.47  23.07 19.32  23.65
 Kenia05  Pig-1  14 骨髓 20.04 16.42  22.09 16.14  22.59
 Kenia05  Pig-1  14 粪便 26.66 25.67  24.98 25.73  25.37
 Kenia05  Pig-1  14 25.48 21.83  23.36 21.53  23.69
 Kenia05  Pig-1  14 淋巴结 21.22 18.10  20.25 17.81  20.43



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