cador TKP PCR Reagent包含实现
T. equigenitalis、
K. pneumoniae和
P. aeruginosa基因组中高度保守的区域的特异且高效的扩增所需的试剂和酶。
此外,
cador TKP PCR Reagent还包括一个异源扩增体系,以鉴别PCR抑制。通过内参(IC)的扩增,检测黄色通道内的荧光信号,测定PCR抑制。内参(IC)的扩增不会影响
T. equigenitalis、
K. pneumoniae和
P. aeruginosa检测试剂的PCR扩增。同时还提供外部阳性对照(TKP Control DNA,包含靶向的
T. equigenitalis、
K. pneumoniae和
P. aeruginosa DNA)。
对每种细菌的DNA进行序列分析,评估分析灵敏度。各real-time PCR实验重复三次。将可观察到扩增现象的最低稀释度的三次平均值定义为检测限(参见下表)。
表1.扩增子的检测阈限
动物病原体 |
检测阈限(基因拷贝数/PCR) |
K. pneumoniae |
2.36 |
P. aeruginosa |
2.52 |
T. equigenitalis |
2.46 |
动物样本材料中还可能存在其他多种病原体。采用
cador TKP PCR Reagent分析其他细菌种属,检测潜在的交叉反应性(参见下表)。检测目标病原体和潜在的干扰细菌的混合物,以检测干扰性。未观察到交叉反应性或干扰性。
表2.对潜在交叉反应的分析
培养菌种 |
交叉反应 |
培养菌种 |
交叉反应 |
Actinobacillus equuli |
未检测到 |
Pseudomonas putida |
未检测到 |
Actinobacillus pleuropneumoniae |
未检测到 |
Rhodococcus equi |
未检测到 |
Arcano pyogenes |
未检测到 |
Salmonella chittagong |
未检测到 |
Citrobacter freundi |
未检测到 |
Salmonella nottingham |
未检测到 |
Enterobacter aerogenes |
未检测到 |
Salmonella poona |
未检测到 |
Enterobacter cloacae |
未检测到 |
Shigella flexneri |
未检测到 |
Enterococcus faecalis |
未检测到 |
Staphylococcus aureus |
未检测到 |
Enterococcus faecium |
未检测到 |
Staphylococcus epidermidis |
未检测到 |
Escherichia coli |
未检测到 |
Streptococcus dysgalactiae |
未检测到 |
Escherichia fergusonii |
未检测到 |
Streptococcus dysgalactiae equisimilus |
未检测到 |
Hafnia alvei |
未检测到 |
Streptococcus equi |
未检测到 |
Oligella urethralis |
未检测到 |
Streptococcus equi zooepidemicus |
未检测到 |
Pasteurella multocida |
未检测到 |
Taylorella asinigenitalis |
未检测到 |
Proteus mirabilis |
未检测到 |
Yersinia enterocolitica |
未检测到 |
Proteus morganis |
未检测到 |
Yersinia fredericksenii |
未检测到 |
Pseudomonas fluorescens |
未检测到 |
Yersinia rohdei |
未检测到 |