text.skipToContent text.skipToNavigation

Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit

用于在Rotor-Gene PCR仪上超快速的多重一步法qRT-PCR基因表达分析
  • 在Rotor-Gene PCR仪上获得超快速、可靠的结果
  • 单管内高灵敏检测多个RNA靶序列
  • 表现优越的多重PCR,无需优化
  • 低丰度和高丰度靶基因高效共扩增

Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit 专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪和其他Rotor-Gene PCR仪,可超快速进行基于序列特异性探针的可靠的多重一步法real-time RT-PCR定量分析。通过调整PCR仪,可在单管内同步定量分析多至4个RNA靶基因(如1个参照和3个靶基因)。配合经优化的预混液和具有独特转子设计的Rotor-Gene PCR仪共同使用,表现卓越。为便于使用,预混液应储存在2–8°C。

Cat No./ID: 204972
Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit (80)
Trial kit for 80 x 25 µl reactions: 1 ml 2x Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Master Mix, 20 µl Rotor-Gene RT Mix, 2 ml RNase-Free Water
Cat No./ID: 204974
Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit (400)
For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Master Mix, 100 µl Rotor-Gene RT Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water

Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


0
可靠的多重分析。
采用双重一步法real-time RT-PCR,配合Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit和自行设计的TaqMan探针检测28S rRNA(Cyanine 670荧光染料;内置数据)和PPIA(亲环素A,FAM荧光染料)。白细胞RNA作为模板(10倍稀释,从100 ng到10 pg)在Rotor-Gene 3000上反应,重复三次反应。双重反应(彩色的)的扩增曲线与那些在不同反应管中反应的扩增曲线(黑白的)重叠,表明该双重分析的可靠性。
4
高效、灵敏的多重分析。
使用[A] HSP90AA1(109、107、105、103或10个拷贝)和[B] GAPDH(109个拷贝)的体外转录产物进行双重一步法real-time RT-PCR(彩色曲线)。在不同反应管中的RT-PCR作为对照(黑白曲线)。双重反应使用Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit和自行设计的TaqMan探针在Rotor-Gene 6000上进行。HSP90AA1曲线间隔的一致性和重叠的GAPDH表明了双重RT-PCR的可靠性。[C] HSP90AA1的扩增效率在理想范围内。
5
高效的四重分析。
所示靶基因使用Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit和自行设计的TaqMan探针进行4重一步法real-time RT-PCR。反应在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR 仪上使用HeLa细胞的100、10、1或0.1 ng RNA进行。CT值与对数后的模板量平行,表明4个靶基因有相同的扩增效率。GAPDH: 甘油醛-3-磷酸脱氢酶;RPS27A: 核糖体蛋白S27a;NFKB: B细胞中的核因子K轻链基因启动子。
Performance
Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit能够对低至高丰度靶基因可靠进行二重、三重、四重定量检测,可检测低至10 pg的模板及10个拷贝的靶基因(参见"Reliable duplex analysis"和"Efficient, sensitive duplex analysis")。多重分析中不同的靶基因以同样的高效率得以扩增(参见"Highly efficient 4-plex analysis")。因此可实现可靠的相对定量检测,标准品为对照基因。
Principle

在同一反应管中扩增参照和靶基因,减少了手动操作失误,提高了基因定量检测的可靠性。Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit能够在Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪上可靠的多重定量检测RNA靶基因,无需优化反应条件(参见"QIAGEN multiplex kits")。进行一步法real-time RT-PCR,使逆转录和PCR扩增在同一反应容器中相继进行。因为无需将逆转录产物转移到另一管中进行PCR,所以real-time RT-PCR的流程得以简化,可实现高通量分析。 

平衡的K+和NH4+离子组合确保高度特异性,促进特异性引物退火,PCR特异性高、灵敏度好。一种新颖的PCR添加剂合成的Factor MP专用于多重PCR应用,能够以同样的效率扩增在同一反应中不同的扩增子(参见"Unique PCR buffer")。

一种新颖的PCR添加剂Q-Bond可缩短扩增时间,确保快速扩增的同时不影响表现(参见"Fast primer annealing")。此外,逆转录酶在15分钟内即可高效的合成cDNA,而高度严谨的热启动酶HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95ºC条件下只需5分钟即可快速激活。

2x Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit组分*
组分 特点 优势
HotStarTaq Plus DNA Polymerase 95ºC条件下5分钟激活 室温下建立qPCR反应体系
Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Buffer 浓度平衡的NH4+和K+离子 特异性引物退火,确保可靠的qPCR结果
合成的Factor MP 在同一反应管中可靠的进行多达4个基因的多重分析
独特的Q-Bond添加剂 更快速的PCR循环,快速获得结果,一天可进行更多的反应
Rotor-Gene RT Mix   RNA亲和性高的逆转录酶 RNA逆转录可在15分钟内完成,甚至包括复杂的二级结构
* 都含有dNTP混合液(dATP, dCTP, dGTP, dTTP)。
Procedure

应用即用型预混液无需优化反应和循环条件。只需在预混液中添加模板RNA和引物探针对、逆转录酶,然后设置PCR仪即可开始实验。试剂盒中提供的操作手册中列出了推荐染料,并为多重RT-PCR分析提供了单独的实验方案。

Applications
Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit专用于Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪,使用序列特异性探针进行快速的一步法RT-PCR分析。该试剂盒也与Rotor-Gene 3000和Rotor-Gene 6000兼容。多达4个cDNA靶基因可在单管内同步快速定量分析,提高通量的同时,节约珍贵的样本。

Features
Specifications
应用 Real-time quantification of RNA targets in a multiplex format
反应类型 Real-time one-step RT-PCR
real-time或终点法PCR Real-time
样本/目标类型 RNA
单一或多重 Multiplex
SYBR Green I或序列特异性探针 Sequence-specific probes
热循环仪 Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
有/无ROX Without ROX dye
fragment fix placeholder