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App. Package, M48, Forensics

方便的设置实验方案,用于法医和遗传身份鉴定

  • 痕量检材,更高得率
  • 更高信噪比
  • Tip dance方式处理固体样本
  • 更优化的实验方案,包括大体积的实验方案
  • 灵活的洗脱体积

App. Package, M48, Forensics是一张光盘,包含在BioRobot M48工作站上应用MagAttract DNA Mini M48 Kit从痕量和参考法医样本中纯化DNA的实验方案。这些实验方案包含的程序提供屏幕指令用于操作工作站,设置简单。

Cat No./ID: 9016150
App. Package, M48, Forensics
Software protocol package for forensics applications, v2.1, on the BioRobot M48 workstation

App. Package, M48, Forensics适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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使用“tip dance”实验方案对固体材料进行简单、有效的处理。
每个烟蒂样本检测到50 ng DNA。蛋白酶K消化后,一半样本去除固体材料,再使用MagAttract DNA Mini M48 Kit经标准痕量实验方案处理。剩下的一半样本使用App. Package, M48, Forensics v2.0进行“tip dance”实验方案处理,无需从样本管中去除固体材料。通过定量real-time RT-PCR定量检测DNA产量。
1
使用大体积实验方案得到更高产量浓缩DNA。
DNA在Buffer G2中稀释到终浓度为50 pg/µl,使用MagAttract DNA Mini M48 Kit经标准痕量实验方案、或用App. Package, M48, Forensics v2.0经大体积实验方案处理指定体积的样本。所有样本都在50 µl纯水中洗脱,取5 µl通过定量real-time PCR进行定量。
2
标准化实验方案可获得统一的产量。
使用MagAttract DNA Mini M48 Kit经标准痕量实验方案、或用App. Package, M48, Forensics v2.0经标准化实验方案从制定体积的全血样本中纯化DNA。所有样本都在50 µl纯水中洗脱。使用标准化实验方案可将DNA产量统一控制在150–250 ng范围内。
3
从血迹织物中纯化的DNA有更高信噪比。
从棉织物上的干血(800个白血细胞)中纯化DNA并用于STR分析。蛋白酶K消化后,在BioRobot M48上使用MagAttract DNA Mini M48 Kit 并[A]用App. Package, M48, Forensics v1.0经痕量实验方案或[B]用Package, M48, Forensics v2.0上经痕量实验方案纯化DNA。PCR产物可在 ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer上经Genotyper软件进行分析。(数据由M. Steinlechner, Institute of Legal Medicine, Innsbruck Medical University, Innsbruck, Austria.提供)
4
从烟蒂唾液中纯化DNA表现出色。
从烟蒂上的干唾液(800个细胞)中纯化DNA并用于STR分析。蛋白酶K消化后,在BioRobot M48上使用MagAttract DNA Mini M48 Kit 并[A]用App. Package, M48, Forensics v1.0经痕量实验方案或[B]用Package, M48, Forensics v2.0经痕量实验方案纯化DNA。PCR产物可在 ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer上用Genotyper软件进行分析。(数据由M. Steinlechner, Institute of Legal Medicine, Innsbruck Medical University, Innsbruck, Austria.提供)
Performance
"tip dance"方式处理固体样本,操作简单

除了标准的痕量方案,还可选用全自动"tip dance"实验方案,移液过程中滤嘴相对工作平台可来回移动。这样可在同一管中直接处理固体样本,如:拭子、织物、血斑或烟头。无需事先离心去除会阻塞滤嘴的固态物质。"tip dance"实验方案简化了操作步骤,在某些情况下能更有效的提取样本提高DNA的产量(参见"Easy and efficient processing of solid materials with the “tip dance” protocol")。

经优化的试验方案,更大的样本量

大体积实验方案可全自动处理的起始样本量至多500 µl。这不仅可以从含有低浓度DNA的稀释样本,如扩散的污渍中高效纯化DNA,而且能够纯化需要用大体积进行彻底裂解的样本。可处理大容量样本(与标准的微量方案有相同的洗脱体积),就可获得更高产量、更高浓度的DNA,在下游应用中有更高的灵敏度(参见"Higher yields of concentrated DNA with the large-volume protocol")。

正常化统一产量

样本与样本之间的差异可导致从参考的血液或唾液样本中得到不同的产量。对于常规的、标准化分析,从这些样本纯化的DNA通常需要在分析前量化。在App. Package, M48, Forensics v2.1上使用正常化实验方案,DNA产量可统一限制于150–250 ng范围内(参见"Uniform yields with the normalization protocol")。这使随后的遗传分析无需测量或调整DNA浓度。纯化得到的DNA可用于下游应用。

灵活的洗脱体积

纯化得到的DNA可用50–400 µl的体积洗脱(50 µl、75 µl、100 µl、150 µl、200 µl、250 µl、300 µl或400 µl),用于对浓度有不同需求的下游应用。根据使用者选择,DNA可用纯水或TE缓冲液洗脱,增加少量纯化得到的DNA的稳定性。

Principle

BioRobot M48和MagAttract DNA Mini M48 Kit配合用于App. Package, M48, Forensics v2.1上的实验方案,可重复自动从法医、人身份和生物安全应用中纯化基因组DNA。每次运行可高效纯化6–48个样本,纯化得到的DNA在下游分析中表现良好,如定量PCR和STR分析,具有高信噪比。

BioRobot M48体系使用硅胶磁性颗粒技术全自动纯化DNA,无需繁琐的离心步骤。即用型工作站可在单次运行中可纯化6–48个样本。处理运行之间,使用集成的紫外灯净化工作台,降低环境污染的机会。

MagAttract DNA Mini M48 Kit配合在App. Package, M48, Forensics v2.1上的实验方案,提供优化的试剂自动纯化DNA,产量高效。STR分析显示在更灵敏的检测中有更高峰(参见"Higher signal-to-noise ratios with DNA purified from blood-stained fabric",在y轴有差异提示)。更高峰和改进的信噪比在下游应用中高灵敏度检测,且表现良好(参见"High performance of DNA purified from saliva on cigarette butts")。

Procedure
MagAttract DNA Mini M48 Forensic Handbook包含即用型优化的预处理实验方案,用于特别类型的法医样本,包括织物上的污渍(参见"Higher signal-to-noise ratios with DNA purified from blood-stained fabric")、烟蒂(参见"High performance of DNA purified from saliva on cigarette butts")、全血、拭子、口香糖、骨头、土壤等等。手册包含单独的实验方案,用于在BioRobot M48上全自动纯化DNA,包括标准痕量实验方案、"tip dance"实验方案、大体积实验方案和正常化实验方案。
Applications

高品质DNA高度适用于许多法医、环境、生物防御、生物安全和其他应用检测,如:

  • 基因分型,包括DNA指纹图谱分析和亲子分析
  • 从痕量样本中纯化DNA
  • 在环境测试中从已使用的过滤器中提取DNA
  • 参考样品的常规分析