从福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片中进行miRNA和总RNA的纯化
- 有效纯化miRNA和总RNA
- 创新方法用于克服福尔马林造成的交联
- 有效释放RNA而不会破坏其完整性
- 85分钟流畅的操作得到RNA
miRNeasy FFPE Kit确保从福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)的组织切片中纯化含约18个核苷酸以上的总RNA。试剂盒能够回收可用的RNA片段,包括miRNA和其他小RNA,用于定量real-time RT-PCR等下游应用。
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miRNeasy FFPE Kit (50)
50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes, Proteinase K, RNase-Free DNase I, DNase Booster Buffer, RNase-Free Buffers, RNase-Free Water
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217504
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miRNeasy FFPE Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。
从FFPE组织中高效纯化RNA。|卓越的产量和实验表现。|高效的real-time RT-PCR。|miRNeasy FFPE实验流程。|
使用miRNeasy FFPE Kit或酚-氯仿抽提从图示的大鼠组织中纯化包括miRNA在内的总RNA。使用miScript PCR System和纯化的RNA作为针对miRNA miR-16的定量real-time RT-PCR分析的模板。结果显示,对于肺和肝脏组织,使用miRNeasy FFPE Kit纯化后的CT值更低,说明其miRNA纯化产量高于使用酚-氯仿抽提的产量。对于肾脏组织,使用两种方法的CT值相当。对于所有检测组织类型,使用miRNeasy FFPE Kit纯化后的CT值均更低或相当。|使用miRNeasy FFPE Kit或Supplier A的同类试剂盒,从图示的大鼠组织的FFPE切片中纯化RNA。[A] 测量260 nm处的吸光值,确定RNA的产量。[B] 使用miScript PCR System和纯化的RNA作为针对miRNA miR-16的定量real-time RT-PCR分析的模板。结果显示,使用miRNeasy FFPE Kit纯化,CT值更低,说明miRNA的产量高于使用Supplier A的试剂盒纯化的产量。|采用福尔马林固定大鼠肝脏组织24小时或60小时,然后使用miRNeasy FFPE Kit纯化包括miRNA在内的总RNA。使用miScript PCR System和纯化的RNA作为模板进行定量real-time RT-PCR分析,检测miRNA miR-16和miR-29a以及PGK1基因的较大mRNA。结果显示,从同一洗脱液中可同时检测到上述两种miRNA和mRNA。||
原理
用福尔马林固定的组织导致RNA-RNA和RNA-蛋白质交联,从而影响了RNA在下游应用中的表现。miRNeasy FFPE Kit提供了独特的裂解和孵育条件,可逆转福尔马林对RNA造成的交联。特别研制的的裂解缓冲液有效地将RNA从组织切片中释放出来,同时避免了RNA的进一步降解。裂解产物用DNase消化,然后优化的结合条件能够纯化含约18个以上核苷酸的所有可用的RNA。
操作流程
所有的miRNeasy FFPE操作流程都可在85分钟之内完成。优化的裂解缓冲液能够用蛋白质酶K消化样本裂解产物,仅需15分钟而且不损耗RNA产量。裂解后,在80°C下孵育样本15分钟逆转福尔马林交联。然后,在优化的DNase消化步骤中,用DNase Booster Buffer快速去除基因组DNA,并且用RNeasy MinElute离心柱纯化浓缩的RNA(参见" miRNeasy FFPE procedure")。由于RNA的洗脱体积仅有14–30 µl,在下游应用中可实现较小的反应体积。
应用
miRNeasy FFPE Kit能够纯化包含miRNA的总RNA,并且适用于多种下游应用,如定量real-time RT-PCR。
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特点
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参数
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应用
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PCR, qPRC, real-time RT-PCR, microArray
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洗脱体积
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14-30 µl
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规格
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Spin column
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主要样本类型
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FFPE tissue samples
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处理
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Manual (protocol for automated processing on QIAcube available)
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纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白
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miRNA, total RNA
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样本量
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up to 4 sections, each with a thickness up to 10 µm and a surface area up to 250mm^2 (automated protocol on QIAcube: up to 2 sections)
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技术
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Silica technology
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产量
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Varies
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Critical factors for molecular analysis of FFPE samples
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Simultaneously profile mRNA, miRNA and lncRNA using a simple, complete workflow
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High-quality, nucleic acid purification for successful PCR and NGS experiments.
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FAQ ID -1737
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FAQ ID -2801
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I received one of the kits in the list below containing the MinElute columns, however they were left out for a while and not stored at 2-8°C upon receipt. Can I still use them? AllPrep DNA/RNA Micro, EpiTect Fast DNA Bisulfite, EpiTect Fast FFPE Bisulfite, EpiTect Fast LyseAll Bisulfite, EpiTect Plus DNA Bisulfite, EpiTect Plus FFPE Bisulfite, EpiTect Plus LyseAll Bisulfite, exoRNeasy Serum/plasma Maxi, exoRNeasy Serum/Plasma Midi, GeneRead DNA FFPE, GeneRead rRNA Depletion, GeneRead Size Selection, MinElute Gel Extraction, MinElute PCR Purification, MinElute Reaction Cleanup, miRNeasy FFPE, miRNeasy Micro, miRNeasy Serum/Plasma, QIAamp DNA FFPE, QIAamp DNA Investigator, QIAamp DNA Micro, QIAamp MinElute Media, QIAamp MinElute Virus Spin, QIAamp MinElute Virus Vacuum, RNeasy FFPE, RNeasy Micro, RNeasy Plus Micro
FAQ ID - 3560
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FAQ ID -828
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FAQ ID -2797
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FAQ ID -2798
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FAQ ID -3002
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For purification of total RNA, including miRNA, from formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections
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从FFPE组织中高效纯化RNA。
使用miRNeasy FFPE Kit或酚-氯仿抽提从图示的大鼠组织中纯化包括miRNA在内的总RNA。使用miScript PCR System和纯化的RNA作为针对miRNA miR-16的定量real-time RT-PCR分析的模板。结果显示,对于肺和肝脏组织,使用miRNeasy FFPE Kit纯化后的CT值更低,说明其miRNA纯化产量高于使用酚-氯仿抽提的产量。对于肾脏组织,使用两种方法的CT值相当。对于所有检测组织类型,使用miRNeasy FFPE Kit纯化后的CT值均更低或相当。
卓越的产量和实验表现。
使用miRNeasy FFPE Kit或Supplier A的同类试剂盒,从图示的大鼠组织的FFPE切片中纯化RNA。[A] 测量260 nm处的吸光值,确定RNA的产量。[B] 使用miScript PCR System和纯化的RNA作为针对miRNA miR-16的定量real-time RT-PCR分析的模板。结果显示,使用miRNeasy FFPE Kit纯化,CT值更低,说明miRNA的产量高于使用Supplier A的试剂盒纯化的产量。
高效的real-time RT-PCR。
采用福尔马林固定大鼠肝脏组织24小时或60小时,然后使用miRNeasy FFPE Kit纯化包括miRNA在内的总RNA。使用miScript PCR System和纯化的RNA作为模板进行定量real-time RT-PCR分析,检测miRNA miR-16和miR-29a以及PGK1基因的较大mRNA。结果显示,从同一洗脱液中可同时检测到上述两种miRNA和mRNA。
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