AllPrep DNA/RNA Mini Kit

从细胞和组织样本中同时纯化DNA和RNA

  • 从同一样本中获得高品质DNA和RNA
  • 从珍稀样本中得到较大量的DNA和RNA
  • 简短流畅的操作流程,实现快速纯化
  • 即用型DNA和RNA,用于多种下游应用
AllPrep DNA/RNA Mini Kit可以从同一个生物样本中同时纯化基因组DNA和总RNA。通过新型的AllPrep DNA离心柱纯化DNA,然后AllPrep柱流出液经过RNeasy MinElute离心柱纯化得到RNA。该试剂盒可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动运行,最多可处理107个细胞或30 mg的组织样本。
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AllPrep DNA/RNA Mini Kit (50)
For 50 minipreps: AllPrep DNA Spin Columns, RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Water and Buffers
80204
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AllPrep DNA/RNA Mini Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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AllPrep DNA/RNA纯化步骤。|同时纯化总RNA和基因组DNA。|对8个靶序列进行多重PCR。|宽泛的动态范围。|高品质总DNA。|
|采用AllPrep技术(AllPrep DNA/RNA Mini Kit)从大鼠肝脏的10 mg样本中纯化总RNA和基因组DNA。[A] 在1.2%的甲醛变性琼脂糖凝胶上分析纯化的RNA。[B] 在0.8%的琼脂糖凝胶上分析纯化的DNA。M: 标记物。|使用AllPrep DNA/RNA Mini Kit从小鼠组织中纯化基因组DNA。对8个靶序列(192–1953 bp;GC含量为19–61%)进行多重PCR分析,每个样本使用10 ng DNA。M:标记物;NTC:无模板对照;Li:肝脏;K:肾脏;Lu:肺。|使用AllPrep DNA/RNA Micro Kit从10倍梯度稀释的大鼠肾脏匀浆液中纯化基因组DNA和总RNA。在每个浓度梯度,都对两份样本进行DNA纯化,对四份样本进行RNA纯化。[A] 对Pgk1基因进行real-time PCR分析[B] 对Jun转录本进行real-time RT-PCR分析。两者都在宽泛的动态范围内显示出可靠的线性契合度,对于5 mg到50 ng的组织样本,都能进行可靠的纯化。|使用AllPrep DNA/RNA Mini Kit从1 x 106个Jurkat细胞中纯化总RNA,在Agilent 2100 Bioanalyzer上进行分析。RIN值为10,表明RNA完整。M:标记物;18S:18S rRNA;28S:28S rRNA。|
性能
简单的流程可从同一样本中纯化高品质DNA和RNA。纯化得到的基因组DNA的平均长度为15–30 kb,适用于多重PCR(参见"Multiplex PCR of 8 targets")。纯化得到高品质的总RNA,RIN值接近10,表明RNA是完整的(参见"Simultaneous purification of total RNA and genomic DNA"和"High-quality total RNA")。AllPrep DNA/RNA纯化技术纯化得到的基因组DNA和总RNA在下游分析中可获得可靠的定量结果(参见"Wide dynamic range")。
原理

AllPrep DNA/RNA Mini Kit用于从单个细胞或组织样本中纯化基因组DNA和总RNA。由于无需将样本分为两份单独进行纯化,可获得较大产量的DNA和RNA。经纯化的DNA和RNA可分别洗脱并直接用于多种下游应用。

操作流程

简单的流程可在35分钟内从同一样本中纯化高品质DNA和RNA(参见"AllPrep DNA/RNA procedure")。培养细胞和易裂解组织均可处理,应用新型AllPrep DNA离心柱纯化基因组DNA,RNeasy MinElute离心柱纯化总RNA。另可选择补充操作流程纯化蛋白质。纯化所得蛋白是变性的,可用于诸如SDS-PAGE、Western印迹和2D凝胶电泳等应用。对于经常从单一样本中纯化DNA、RNA和蛋白质的实验,可使用AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit。

在Buffer RLT Plus(AllPrep DNA/RNA Mini Kit中提供)中破碎并匀浆组织时,可能出现很多泡沫。可在开始破碎和匀浆前,在Buffer RLT Plus加入Reagent DX(单独订购),终浓度为0.5%(v/v),即可有效消除泡沫。Reagent DX已经过精密测试,对于RNA纯度和诸如real-time RT-PCR等下游应用没有影响。添加了Reagent DX的Buffer RLT Plus可在室温(15–25ºC)下至少保存9个月。

应用

纯化的基因组DNA的平均长度为15–30 kb,取决于匀浆情况,适合多种应用,包括:Southern印迹、斑点杂交和狭缝印迹、DNA甲基化分析、PCR和多重PCR。

经纯化的总RNA可即用于多种应用,包括:RT‑PCR和real‑time RT‑PCR、差异显示、cDNA合成、Northern印迹、斑点杂交和狭缝印迹、微阵列分析。

另可选择补充操作流程纯化蛋白质。纯化所得蛋白是变性的,可用于以下应用:SDS-PAGE 、Western印迹、2D凝胶电泳。

特点
参数
应用 PCR, real-time PCR, microarray, blotting
洗脱体积 100 µl
规格 Spin column
主要样本类型 Cells, tissue
处理 Manual (centrifugation)
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 Genomic DNA, total RNA
样本量 1 x 10e7/30 mg
技术 Silica technology
每次运行或制备时间 35 minutes
产量 Varies

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试剂盒操作手册
1
For simultaneous purification of genomic DNA and total RNA from the same animal cell or tissue sample
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参考文献
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图片
AllPrep DNA/RNA procedure
AllPrep DNA/RNA纯化步骤。
Simultaneous purification of total RNA and genomic DNA
同时纯化总RNA和基因组DNA。
采用AllPrep技术(AllPrep DNA/RNA Mini Kit)从大鼠肝脏的10 mg样本中纯化总RNA和基因组DNA。[A] 在1.2%的甲醛变性琼脂糖凝胶上分析纯化的RNA。[B] 在0.8%的琼脂糖凝胶上分析纯化的DNA。M: 标记物。
Multiplex PCR of 8 targets
对8个靶序列进行多重PCR。
使用AllPrep DNA/RNA Mini Kit从小鼠组织中纯化基因组DNA。对8个靶序列(192–1953 bp;GC含量为19–61%)进行多重PCR分析,每个样本使用10 ng DNA。M:标记物;NTC:无模板对照;Li:肝脏;K:肾脏;Lu:肺。
Wide dynamic range
宽泛的动态范围。
使用AllPrep DNA/RNA Micro Kit从10倍梯度稀释的大鼠肾脏匀浆液中纯化基因组DNA和总RNA。在每个浓度梯度,都对两份样本进行DNA纯化,对四份样本进行RNA纯化。[A] 对Pgk1基因进行real-time PCR分析[B] 对Jun转录本进行real-time RT-PCR分析。两者都在宽泛的动态范围内显示出可靠的线性契合度,对于5 mg到50 ng的组织样本,都能进行可靠的纯化。
High-quality total RNA
高品质总DNA。
使用AllPrep DNA/RNA Mini Kit从1 x 106个Jurkat细胞中纯化总RNA,在Agilent 2100 Bioanalyzer上进行分析。RIN值为10,表明RNA完整。M:标记物;18S:18S rRNA;28S:28S rRNA。