从组织或细胞中自动纯化总RNA,或是含有miRNA的总RNA

  • 预装试剂条,使用方便
  • 标准化的操作确保高重复性
  • 经优化的操作得到高产量、高纯度的RNA
  • 条形码实现样本和试剂的追踪

QIAsymphony RNA Kit可在QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪上从1–96个样本中自动纯化总RNA,或是含有miRNA的总RNA和其他小分子RNA。可从动物细胞、组织或者福尔马林固定、石蜡包埋组织中纯化总RNA,需要的起始材料量少(≥100个细胞),至多1 x 107个细胞或50 mg的组织。经优化的实验方案可获得高产量、高纯度的总RNA,或是含有miRNA的总RNA;洗脱体积灵活,因而可以根据不同下游应用优化调整RNA浓度。预装试剂条减少了工作站设置时间,并减少了手动操作。条形码阅读器进行试剂全程跟踪。

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QIAsymphony RNA Kit
For as many as 192 preps, depending on protocol: includes 2 reagent cartridges and enzyme racks and accessories
931636
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QIAsymphony RNA Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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对RNA的纯化具有可重复性。|自动纯化的RNA品质与手动纯化的品质相当。|高纯度的完整RNA。|高效处理磁性颗粒。|密封的预填装卡夹。|
在QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪上使用QIAsymphony RNA Kit从Jurkat细胞中纯化RNA。比较使用2种不同批次的试剂盒在2台仪器上获得的RNA产量与使用RNeasy Mini Kit手动纯化的产量。每个误差条代表4个样本的平均值。|[A] 在QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪上使用QIAsymphony RNA Kit,从大鼠肾脏和脾脏样本 (每种样本各10 mg) 中纯化RNA,样本置于RNAlater RNA Stabilization Reagent中稳定。[B] 使用RNeasy Mini Kit,从大鼠肾脏和脾脏样本 (每种样本各10 mg) 中手动纯化RNA,样本置于RNAlater RNA Stabilization Reagent中稳定。采用琼脂糖凝胶电泳比较使用QIAsymphony RNA Kit及使用RNeasy Mini Kit手动纯化的RNA产量。|利用QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪从Jurkat细胞中纯化的RNA的RIN (RNA完整性指数) 值在9.9至10之间,28S/18S rRNA比例为2.0–2.1,表示分离得到了完整的RNA。|采用QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪,按下述方法处理含有磁粒的样本。覆盖有棒套的磁力棒伸入含有样本的反应孔内,吸引磁粒。覆盖有棒套的磁力棒移至另一孔的上方,释放磁粒。QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪采用包括24根磁力棒的磁头,可同时处理24个样本。重复第1步和第2步进行样本处理。|试剂盒预装了纯化步骤所需的包括酶在内的全部试剂,并标有2D条形码。部分使用过的试剂盒可重新密封供后续使用,以帮助您控制成本。|
性能
在QIAsymphony SP工作站上的RNA自动纯化流程与手动纯化流程相同,从培养细胞、组织和福尔马林固定、石蜡包埋组织中,纯化得到高产量、高品质RNA(参见"Reproducible purification of RNA")。QIAsymphony纯化总RNA的实验方案主要纯化大于200个核苷酸的RNA,包括mRNA(参见"Highly pure, intact RNA")。QIAsymphony miRNA实验方案也纯化总RNA,但不排除<200个核苷酸的RNA,如 miRNA和其他小分子RNA(参见"Automated purification comparable to manual procedure")。
原理
QIAsymphony RNA Kit将硅胶膜技术的速度、效率与易于操作的磁性颗粒相结合(参见"Efficient handling of magnetic particles")。在蛋白酶K处理后,纯化>200个核苷酸的总RNA,或包含miRNA的总RNA和其他小分子。起始材料包括动物细胞和组织。配合一些额外的组分,可以用该试剂盒纯化福尔马林固定、石蜡包埋组织。 裂解样本,然后通过将其结合到离液盐中的硅胶表面上的颗粒中,将RNA从裂解物中一步纯化。使用磁珠将颗粒从裂解物分离,然后使用不含RNase的DNase处理,去除DNA。充分洗涤磁珠,随后用不含RNase的纯水洗脱得到RNA。
操作流程

创新的即用型试剂条预装有磁性颗粒和所有纯化过程需要的试剂,包括附加的酶。这些试剂条可在QIAsymphony SP工作站上被自动打开,有助于降低污染的风险(参见"Prefilled, sealed reagent cartridges")。台面设置快速,节省你的宝贵时间。只需简单的在试剂置入模块中加载至多2个试剂条。试剂条可以来自相同的试剂盒,也可以是不同的试剂盒,因此可在处理96个样本的同一批次中,运行不同的纯化步骤。试剂仅会用于所选数目的样本,实现成本控制。纯化操作流程包括4 个步骤:裂解、结合、洗涤和洗脱。提供多种在QIAsymphony SP工作站上进行RNA纯化的实验方案,取决于起始材料和所需的RNA产物(参见下表)。

使用QIAsymphony SP纯化RNA的实验方案
实验方案 配套使用 样本材料(预处理样本裂解物) 处理体积(μl)
RNA CT 400 QIAsymphony RNA Kit  (192) ≤3 x 106个培养细胞
≤20 mg易裂解的组织
400 μl
RNA CT 800 QIAsymphony RNA Kit (2 x 48) 3 x 106–1 x 107个培养细胞
≤50 mg易裂解的组织
800 μl
RNA FT 400* QIAsymphony RNA Kit (192) ≤20 mg纤维组织 400 μl
miRNA CT 400* QIAsymphony RNA Kit (192) ≤3 x 106个培养细胞
≤20 mg组织
400 μl
RNA FFPE 130 QIAsymphony RNA Kit (2 x 72) 1–2 x FFPE切片至多10 μm
1 x FFPE切片20 μm
130 μl
* 需要使用蛋白酶K,需要单独订购。
需要其他组分,需要单独订购。
应用

使用QIAsymphony RNA Kit在QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪上实现总RNA的全自动纯化过程,得到高品质RNA,广泛用于各种下游应用。

特点
参数
应用 RT-PCR; Real-Time PCR; Expression Profiling
洗脱体积 50-200 µl
样本量 400 µl lysate from <20 mg tissue or 3 x 10e6 cells or 800 µl lysate from <50 mg tissue or 3 x 10e6 cells

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Labware Files and Documents
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For use with the QIAsymphony SP/AS instruments (software version 4.0)
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