RNeasy Micro Kit

For purification of up to 45 µg total RNA from cell and tissue samples
  • Fast procedure delivering high-quality total RNA in minutes
  • Ready-to-use RNA for high performance in any downstream application
  • Consistent RNA yields from very small amounts of starting material
  • No phenol/chloroform extraction
  • No CsCl gradients, no LiCl or ethanol precipitation

The RNeasy Micro Kit is designed for purification of up to 45 μg RNA from small cell and tissue samples. Tissue samples can be conveniently stabilized using RNAprotect Tissue Reagent or Allprotect Tissue Reagent, and efficiently disrupted using a TissueRuptor or TissueLyser system. RNA purification using the RNeasy Micro Kit can be fully automated on the QIAcube Connect. For larger samples, the RNeasy Mini Kit (spin-column binding capacity of 100 µg RNA), RNeasy Midi Kit (spin-column binding capacity of 1 mg RNA), and RNeasy Maxi Kit (spin-column binding capacity of 6 mg RNA) are also available.

製品名 Cat. no. List price:
RNeasy Micro Kit (50)
50 RNeasy MinElute Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free DNase I, Carrier RNA, RNase-free Reagents and Buffers
74004
¥51,000

RNeasy Micro Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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高感度なアプリケーションでの高い再現性|穿刺吸引法サンプルからの高品質トータルRNA|RNeasy Micro調製法|カラム上でゲノムDNAを効率的に除去|単一細胞からの確実なRNA精製|
5人のユーザーが表記のラット組織2 mgからRNeasy Micro Kitを用いてトータルRNA精製をduplicateで行なった。リアルタイム定量RT-PCRは、QuantiTect Probe RT-PCR Kitとc-junに特異的なプライマー、プローブを用いてABI Sequence Detection Systemで行なった。|19.5 Gのバイオプシー針を用いてウサギ肝臓から採取した穿刺吸引サンプルを、即座にRNAlater TissueProtect Tube中で安定化した。トータルRNAはRNeasy Micro Kitを用いて精製した。Agilent 2100 BioAnalyzerでのスキャンニングはRNAの品質の高さを示した。|RNeasy Micro Kitは少量のサンプルからトータルRNAを精製するためにデザインされている。マイクロダイセクション組織、少量の標準的な組織、線維性組織、細胞のRNA精製には、至適化済みのプロトコールが付属している。RNAクリーンアップおよび濃縮のプロトコールを揃えている。|RNeasy Micro Kitを用いて表記数のHeLa細胞からトータルRNAを精製した。リアルタイム定量PCRはc-junに特異的なプライマーとプローブを用いてQuantiTect Probe PCR KitによりABI Sequence Detection Systemで検出した。カラム上でのDNase分解の効率を調べるために、各サンプルを逆転写後増幅した場合(+RT)と逆転写ステップを行なわず、直接増幅した場合(-RT)とで比較した。"-RT"サンプルにおいてシグナルがないのはDNAが検出されなかったことを示唆している。50,000個の細胞を用いた"-RT"結果のみを示した。|RNeasy Micro Kitを用いて表記数のHeLa細胞からトータルRNAを精製した。[A] 増幅プロット。[B] Crossing point(CP)値と細胞数の相関関係図。リアルタイムRT-PCRは、β-actinに特異的なプライマー、プローブとQuantiTect Probe RT-PCR Kitを用いてLightCyclerシステムで行なった。|
パフォーマンス
The RNeasy Micro Kit delivers highly reproducible yields of total RNA from small samples. Total RNA can reliably be purified from small numbers of cells, including a single cell, as well as from small amounts of standard tissues (see figures "Reliable RNA isolation from a single cell", "Highly reproducible yields for sensitive applications" and "High-quality total RNA from fine needle aspirates"). The RNeasy Micro Kit provides maximum sensitivity with precious samples in quantitative gene expression analyses, such as real-time RT-PCR, by efficient on-column digestion of genomic DNA (see figure "Efficient on-column removal of genomic DNA").
原理

The RNeasy Micro Kit is designed for isolation of total RNA from small samples such as microdissected tissues and fine needle aspirates, from milligram amounts of fibrous tissues including heart and muscle tissue, and from small numbers of cells down to single cells (e.g., FACS sorted cells). For microdissected FFPE tissues, we recommend the RNeasy FFPE Kit. RNeasy technology simplifies total RNA isolation by combining the stringency of guanidine-isothiocyanate lysis with the speed and purity of silica-membrane purification and the unique design of RNeasy MinElute spin columns enables minimal elution volumes, as little as 10 µl, to concentrate the RNA. The small elution volume means that reaction volumes can be kept small in downstream applications, giving increased reaction efficiency. The high purity allows the complete sample to be used in downstream reactions, such as reverse transcription, without enzyme inhibition.

操作手順

The RNeasy Micro Kit is designed for isolation of total RNA from small samples. Samples (<5 mg tissue, or <5 x 105 cells) are first lysed and then homogenized. Ethanol is added to the lysate to provide ideal binding conditions. The lysate is then loaded onto the RNeasy MinElute spin column and RNA (up to 45 µg) binds to the silica membrane. RNase-free DNase, provided in the RNeasy Micro Kit, enables simple and efficient on-column digestion of genomic DNA for sensitive applications. Then DNase and any contaminants are efficiently washed away, and pure, concentrated RNA is eluted in 10–14 µl water.

アプリケーション

Highly reproducible isolation of RNA in a small elution volume (10 µl) using the RNeasy Micro Kit makes the highly pure RNA well-suited for sensitive quantitative gene expression analyses, including real-time RT-PCR starting with as little as one cell.

Feature
Specifications
Applications Northern, dot, and slot blotting, end-point RT-PCR, quantitative, real-time RT-PCR, array analysis, next-generation sequencing
Elution volume 10–14 µl
Format Spin column
Main sample type Tissue, cells
Processing Manual
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein RNA
Sample amount <5 mg
Technology Silica technology
Time per run or per prep 30–40 minutes
Yield Varies

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FAQ
49
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キットハンドブック
2
以下のような微量サンプルからのトータルRNA精製用
  動物およびヒト細胞(≤5 x 105)
  動物およびヒト組織(≤5 mg)
  繊維性組織(≤5 mg)
  マイクロダイセクション法により採取した凍結切片
およびRNAのクリーンアップと濃縮
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クイックスタートプロトコール
1
MSDS
1
Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.
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安全データシート
2
画像
Highly reproducible yields for sensitive applications.
高感度なアプリケーションでの高い再現性

5人のユーザーが表記のラット組織2 mgからRNeasy Micro Kitを用いてトータルRNA精製をduplicateで行なった。リアルタイム定量RT-PCRは、QuantiTect Probe RT-PCR Kitとc-junに特異的なプライマー、プローブを用いてABI Sequence Detection Systemで行なった。

High-quality total RNA from fine needle aspirates.
穿刺吸引法サンプルからの高品質トータルRNA
19.5 Gのバイオプシー針を用いてウサギ肝臓から採取した穿刺吸引サンプルを、即座にRNAlater TissueProtect Tube中で安定化した。トータルRNAはRNeasy Micro Kitを用いて精製した。Agilent 2100 BioAnalyzerでのスキャンニングはRNAの品質の高さを示した。
RNeasy Micro Procedure
RNeasy Micro調製法

RNeasy Micro Kitは少量のサンプルからトータルRNAを精製するためにデザインされている。マイクロダイセクション組織、少量の標準的な組織、線維性組織、細胞のRNA精製には、至適化済みのプロトコールが付属している。RNAクリーンアップおよび濃縮のプロトコールを揃えている。

Efficient on-column removal of genomic DNA.
カラム上でゲノムDNAを効率的に除去
RNeasy Micro Kitを用いて表記数のHeLa細胞からトータルRNAを精製した。リアルタイム定量PCRはc-junに特異的なプライマーとプローブを用いてQuantiTect Probe PCR KitによりABI Sequence Detection Systemで検出した。カラム上でのDNase分解の効率を調べるために、各サンプルを逆転写後増幅した場合(+RT)と逆転写ステップを行なわず、直接増幅した場合(-RT)とで比較した。"-RT"サンプルにおいてシグナルがないのはDNAが検出されなかったことを示唆している。50,000個の細胞を用いた"-RT"結果のみを示した。
Reliable RNA isolation from a single cell.
単一細胞からの確実なRNA精製
RNeasy Micro Kitを用いて表記数のHeLa細胞からトータルRNAを精製した。[A] 増幅プロット。[B] Crossing point(CP)値と細胞数の相関関係図。リアルタイムRT-PCRは、β-actinに特異的なプライマー、プローブとQuantiTect Probe RT-PCR Kitを用いてLightCyclerシステムで行なった。