QIAEX II Gel Extraction Kit

从凝胶和溶液中纯化DNA片段(40 bp–50 kb)

  • 高效回收40 bp到50 kb的DNA
  • 从TAE或TBE琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA
  • 无碘化钠,避免干扰后续反应
  • 避免DNA大片段的剪切

QIAEX II Gel Extraction Kit提供硅胶颗粒悬浮液,在离液盐存在的条件下,DNA片段结合到硅胶颗粒上。QIAEX II Suspension添加到溶液或溶解的琼脂糖凝胶中结合DNA。通过简单的离心操作收集硅胶颗粒,洗涤后用Tris缓冲液或纯水洗脱得到40 bp–50 kb的DNA。

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QIAEX II Gel Extraction Kit (150)
For 150 extractions: 3 x 0.5 ml QIAEX II Suspension, Buffers
20021
询价
QIAEX II Gel Extraction Kit (500)
For 500 extractions: 5 x 1.0 ml QIAEX II Suspension, Buffers
20051
询价

QIAEX II Gel Extraction Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。


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QIAEX II实验流程。|pH Indicator Dye。|回收率稳定。|
|利用溶解液和结合缓冲液中的pH指示剂染料可轻松观测DNA吸附的最佳pH值 (pH ≤7.5)。如果琼脂糖凝胶电泳缓冲液使用频繁或者配制不当,则会出现错误的结合混合物pH值。此时,可加入10 µl 3 M醋酸钠 (pH 5.0) 轻松调整pH值。|使用QIAEX II Gel Extraction Kit,从1%琼脂糖凝胶中回收的不同量的2.9 kb DNA片段如图所示。|
性能

使用QIAEX II Gel Extraction Kit可高效回收获得10 ng到10 µg DNA(参见"Consistent recovery")。使用30 µl的QIAEX II悬浮液,多功能的批处理程序使结合能力很容易达到15 µg的DNA。

QIAEX II Gel Extraction Kit应用硅颗粒纯化DNA片段(40 bp–50 kb),回收率可达60–95%。10 µl QIAEX II悬浮液可结合至多5 µg的DNA,后续洗脱液只需20 µl。

根据片段大小回收
DNA大小回收率,百分比*
44 bp 75
75 bp 75
500 bp 95
7.5 kb 85
23.5 kb 75
48.5 kb 60
* 从上样2 µg的1% TAE琼脂糖凝胶回收
原理

使用QIAEX II体系纯化DNA片段的基本条件是,在离液盐存在的情况下,琼脂糖处于溶解状态,并且核酸可选择性的吸附到QIAEX II硅胶颗粒上。QIAEX II可从盐、琼脂糖、聚丙烯酰胺、染料、蛋白质和核酸中纯化DNA,无需苯酚提取或乙醇沉淀。QIAEX II对TAE和TBE缓冲液中的多种琼脂糖都有效。

QIAEX II颗粒确保高效回收DNA,且不被剪切,大片段的DNA也不例外。碘化钠是一种不容易从DNA样本中去除,还会影响后续反应的物质,优化的缓冲液可使回收的DNA中不含碘化钠。

QIAEX II体系使用的溶解和结合缓冲液包含一种特殊的pH指示剂。简单的颜色变化即可指示结合混合液的最佳pH值,确保DNA有效吸附到QIAEX II硅胶颗粒(参见"pH indicator dye")。有色染料也容易辨别结合混合液中未溶解的琼脂糖,确保完全溶解,获得最大的DNA产量。

操作流程

QIAEX II硅胶颗粒加入到溶解的凝胶碎片中,颗粒通过简单的离心操作收集(参见"QIAEX II procedure")。洗涤后,纯DNA用20 µl Tris缓冲液或水洗脱。

QIAEX II Gel Extraction Kit包括QIAEX II Suspension,结合和洗脱缓冲液,以及一本全面的手册。QIAEX II Suspension也可单独购买。有从琼脂糖凝胶、溶液和聚丙烯酰胺凝胶中纯化DNA的实验方案。

应用

QIAEX II体系纯化得到的DNA可即用于多种应用,包括:

限制性酶切
标记
连接
PCR
特点
参数
结合能力 5 µg/10 µl
洗脱体积 20 µl
规格 Tube
片段大小 40 bp – 50 kb
处理 Manual
回收:寡核苷酸dsDNA Recovery: dsDNA fragments
去除<10mers、17–40mers的染料终止子蛋白 Removal <40mers
样本类型:应用 DNA: PCR reactions
技术 Silica technology

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参考文献
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图片
QIAEX II Procedure
QIAEX II实验流程。
ILLU_0104_MinElute
pH Indicator Dye。
利用溶解液和结合缓冲液中的pH指示剂染料可轻松观测DNA吸附的最佳pH值 (pH ≤7.5)。如果琼脂糖凝胶电泳缓冲液使用频繁或者配制不当,则会出现错误的结合混合物pH值。此时,可加入10 µl 3 M醋酸钠 (pH 5.0) 轻松调整pH值。
Consistent Recovery from Different Starting Quantities of DNA Fragment
回收率稳定。
使用QIAEX II Gel Extraction Kit,从1%琼脂糖凝胶中回收的不同量的2.9 kb DNA片段如图所示。