細胞および組織からのDNAおよびRNA細胞の同時精製
  • 同一サンプルから高品質の DNA および RNA
  • 貴重なサンプルから最大限の収量で DNAおよびRNAを精製
  • 簡単で効率的なプロトコールにより迅速に精製
  • 全てのダウンストリームアプリケーションに即使用可能な DNA および RNA
AllPrep DNA/RNA Mini Kitは同一の生体サンプルから同時にゲノムDNAとトータルRNAを精製できます。DNAは画期的なAllPrep DNA Spin Columnにより精製され、RNAはRNeasy Mini Spin Columnを用いてAllPrepカラムのフロースルーから精製します。本キットはQIAcubeで自動化することができ、最高107個の細胞あるいは30 mgの組織を調製できます。
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AllPrep DNA/RNA Mini Kit (50)
For 50 minipreps: AllPrep DNA Spin Columns, RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Water and Buffers
80204
S Fr. 683.00
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The AllPrep DNA/RNA Mini Kit is intended for molecular biology applications. This product is not intended for the diagnosis, prevention, or treatment of a disease.
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AllPrep DNA/RNA procedure.|Simultaneous purification of total RNA and genomic DNA.|Multiplex PCR of 8 targets.|Wide dynamic range.|High-quality total RNA.|
|Total RNA and genomic DNA were purified from 10 mg samples of rat liver using AllPrep technology (the AllPrep DNA/RNA Mini Kit). [A] Purified RNA samples were analyzed on a 1.2% formaldehyde agarose gel. [B] Purified DNA samples were analyzed on a 0.8% agarose gel. M: markers.|Genomic DNA was purified from mouse tissues using the AllPrep DNA/RNA Mini Kit. Multiplex PCR of 8 targets (192–1953 bp; GC content in the range of 19–61%) was performed using 100 ng DNA per sample. M: markers; NTC: no template control; Li: liver; K: kidney; Lu: lung.|Genomic DNA and total RNA were purified from 10-fold serial dilutions of rat kidney homogenate using the AllPrep DNA/RNA Micro Kit; at each dilution, DNA was purified from duplicates, and RNA was purified from 4 replicates. [A] Real-time PCR analysis of the Pgk1 gene and [B] real-time RT-PCR analysis of the Jun transcript showed reliable quantification over a wide dynamic range, from 5 mg down to 50 ng tissue.|Total RNA was purified from 1 x 106 Jurkat cells using the AllPrep DNA/RNA Mini Kit and analyzed on the Agilent 2100 Bioanalyzer. The RIN value was 10, indicating intact RNA. M: marker; 18S: 18S rRNA; 28S: 28S rRNA.|
Performance
同一サンプルから高品質なDNAおよびRNAを簡便な操作手順で精製できます。精製したゲノムDNAは、平均長15~30 kbで、マルチプレックスPCRで良好な結果が得られます(図"8種類のターゲットのマルチプレックスPCR")。トータルRNAは高品質であり、RIN値は10で、RNAが分解されていないことを示しています(図"トータルRNAおよびゲノムDNAの同時精製"および図"高品質なトータルRNA")。AllPrep DNA/RNAテクノロジーを用いて精製されたゲノムDNAおよびトータルRNAを用いた解析により、幅広いダイナミックレンジにわたり信頼性の高い定量化が示されます(図"幅広いダイナミックレンジ")。
Principle

AllPrep DNA/RNA Mini Kitは単一細胞あるいは組織サンプルからゲノムDNAおよびトータルRNAの両方を精製するようデザインされています。本キットを用いた分離精製法によりサンプルを分割する必要がなく、最大収量でDNAおよびRNAが精製できます。精製したDNAおよびRNAは別々に溶出でき、あらゆるダウンストリームアプリケーションに即使用できます。

Procedure

同一サンプルから高品質なDNAおよびRNAをわずか35分で高収量で分離精製できます(フローチャート"AllPrep DNA/RNA操作手順")。本キットは培養細胞および溶解しやすい動物組織に使用できます。ゲノムDNAは斬新なAllPrep DNA Spin Columnを用いて、トータルRNA はRNeasy Mini Spin Columnを用いて精製します。Supplementary Protocolを用いてオプションのタンパク質精製も可能です。DNA、RNA、タンパク質を各サンプルから定期的に調製するような実験には、代わりにAllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kitを用いることができます。

Buffer RLT Plus(AllPrep DNA/RNA Mini Kit に添付)で組織を破砕およびホモジナイズする時、気泡が大量に生じることがあります。破砕とホモジナイゼーションの前に、Buffer RLT PlusにReagent DX(別売)を最終濃度が0.5%(v/v)になるように添加することにより、気泡の発生が抑えられます。Reagent DXは本キットで十分にテストされており、RNA純度あるいはリアルタイムRT-PCRのようなダウンストリームアプリケーションへの影響はありません。Reagent DXを含むBuffer RLT Plusは、室温(15~25℃)で少なくとも9ヶ月は保存できます。

Applications

精製したゲノムDNAはホモジナイゼーション条件によりますが、平均15~30 kbの長さで、サザン、ドット、スロットブロット解析、PCR、マルチプレックスPCRを含むあらゆるアプリケーションに最適です。

精製したトータルRNAは、RT-PCRおよびリアルタイムRT-PCR、ディファレンシャルディスプレイ、cDNA合成、ノーザン、ドット、スロットブロット解析、マイクロアレイを含むあらゆるアプリケーションに用いることができます。

Supplementary Protocolを用いてオプションでタンパク質精製が可能です。精製したタンパク質は変性され、SDS-PAGE、ウェスタンブロット、2Dゲル電気泳動のようなアプリケーションに使用できます。

Feature
Specifications
Applications PCR, real-time PCR, microarray, blotting
Elution volume 100 µl
Format Spin column
Main sample type Cells, tissue
Processing Manual (centrifugation)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein Genomic DNA, total RNA
Sample amount 1 x 10e7/30 mg
Technology Silica technology
Time per run or per prep 35 minutes
Yield Varies

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Kit Handbooks
1
For simultaneous purification of genomic DNA and total RNA from the same animal cell or tissue sample
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References
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