AllPrep DNA/RNA Mini Kit

細胞および組織からのDNAおよびRNA細胞の同時精製
  • 同一サンプルから高品質の DNA および RNA
  • 貴重なサンプルから最大限の収量で DNAおよびRNAを精製
  • 簡単で効率的なプロトコールにより迅速に精製
  • 全てのダウンストリームアプリケーションに即使用可能な DNA および RNA
AllPrep DNA/RNA Mini Kitは同一の生体サンプルから同時にゲノムDNAとトータルRNAを精製できます。DNAは画期的なAllPrep DNA Spin Columnにより精製され、RNAはRNeasy Mini Spin Columnを用いてAllPrepカラムのフロースルーから精製します。本キットはQIAcubeで自動化することができ、最高107個の細胞あるいは30 mgの組織を調製できます。
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AllPrep DNA/RNA Mini Kit (50)
For 50 minipreps: AllPrep DNA Spin Columns, RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Water and Buffers
80204
¥68,000

AllPrep DNA/RNA Mini Kit  は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。


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AllPrep DNA/RNA操作手順|トータルRNAおよびゲノムDNAの同時精製|8種類のターゲットのマルチプレックスPCR|幅広いダイナミックレンジ|高品質トータルRNA|
|AllPrepテクノロジー(AllPrep DNA/RNA Mini Kit)を用いてラット肝臓サンプル10 mgからトータルRNAとゲノムDNAを精製した。[A] 精製したRNAを1.2%ホルムアルデヒドアガロースゲルで解析した。[B] 精製したDNAを0.8%アガロースゲルで解析した。M:マーカー。|AllPrep DNA/RNA Mini Kit を用いてマウス組織からゲノムDNA を精製した。サンプルあたり100 ngのDNAを用いて8種類のターゲット(192~1953 bp、GC含有率は19~61%)のマルチプレックスPCRを行なった。M:マーカー、NTC:テンプレートを含まないコントロール、Li:肝臓、K:腎臓、Lu:肺。|AllPrep DNA/RNA Micro Kitを用いて腎臓ホモジネートの10倍連続希釈液からゲノムDNAとトータルRNAを精製した。各希釈液ごとにDNAはduplicates、RNAは4 replicatesで精製した。[A] Pgk1遺伝子のリアルタイムPCR解析、および[B] Jun転写物のリアルタイムRT-PCR解析は、5 mgから50 ngの組織で正確な定量が広範囲で行なえたことを示している。|AllPrep DNA/RNA Mini Kitを用いてJurkat細胞(1 x 106)からトータルRNAを精製し、Agilent 2100 Bioanalyzerで解析した。RIN値が10であることから、RNAが分解されていないことを示す。M:マーカー、18S:18S rRNA、28S:28S rRNA。|
パフォーマンス
同一サンプルから高品質なDNAおよびRNAを簡便な操作手順で精製できます。精製したゲノムDNAは、平均長15~30 kbで、マルチプレックスPCRで良好な結果が得られます(図"8種類のターゲットのマルチプレックスPCR")。トータルRNAは高品質であり、RIN値は10で、RNAが分解されていないことを示しています(図"トータルRNAおよびゲノムDNAの同時精製"および図"高品質なトータルRNA")。AllPrep DNA/RNAテクノロジーを用いて精製されたゲノムDNAおよびトータルRNAを用いた解析により、幅広いダイナミックレンジにわたり信頼性の高い定量化が示されます(図"幅広いダイナミックレンジ")。
原理

AllPrep DNA/RNA Mini Kitは単一細胞あるいは組織サンプルからゲノムDNAおよびトータルRNAの両方を精製するようデザインされています。本キットを用いた分離精製法によりサンプルを分割する必要がなく、最大収量でDNAおよびRNAが精製できます。精製したDNAおよびRNAは別々に溶出でき、あらゆるダウンストリームアプリケーションに即使用できます。

操作手順

同一サンプルから高品質なDNAおよびRNAをわずか35分で高収量で分離精製できます(フローチャート"AllPrep DNA/RNA操作手順")。本キットは培養細胞および溶解しやすい動物組織に使用できます。ゲノムDNAは斬新なAllPrep DNA Spin Columnを用いて、トータルRNA はRNeasy Mini Spin Columnを用いて精製します。Supplementary Protocolを用いてオプションのタンパク質精製も可能です。DNA、RNA、タンパク質を各サンプルから定期的に調製するような実験には、代わりにAllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kitを用いることができます。

Buffer RLT Plus(AllPrep DNA/RNA Mini Kit に添付)で組織を破砕およびホモジナイズする時、気泡が大量に生じることがあります。破砕とホモジナイゼーションの前に、Buffer RLT PlusにReagent DX(別売)を最終濃度が0.5%(v/v)になるように添加することにより、気泡の発生が抑えられます。Reagent DXは本キットで十分にテストされており、RNA純度あるいはリアルタイムRT-PCRのようなダウンストリームアプリケーションへの影響はありません。Reagent DXを含むBuffer RLT Plusは、室温(15~25℃)で少なくとも9ヶ月は保存できます。

アプリケーション

精製したゲノムDNAはホモジナイゼーション条件によりますが、平均15~30 kbの長さで、サザン、ドット、スロットブロット解析、PCR、マルチプレックスPCRを含むあらゆるアプリケーションに最適です。

精製したトータルRNAは、RT-PCRおよびリアルタイムRT-PCR、ディファレンシャルディスプレイ、cDNA合成、ノーザン、ドット、スロットブロット解析、マイクロアレイを含むあらゆるアプリケーションに用いることができます。

Supplementary Protocolを用いてオプションでタンパク質精製が可能です。精製したタンパク質は変性され、SDS-PAGE、ウェスタンブロット、2Dゲル電気泳動のようなアプリケーションに使用できます。

Feature
Specifications
Applications PCR, real-time PCR, microarray, blotting
Elution volume 100 µl
Format Spin column
Main sample type Cells, tissue
Processing Manual (centrifugation)
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein Genomic DNA, total RNA
Sample amount 1 x 10e7/30 mg
Technology Silica technology
Time per run or per prep 35 minutes
Yield Varies

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Brochures & Guides
1
Kit Handbooks
1
For simultaneous purification of genomic DNA and total RNA from the same animal cell or tissue sample
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Safety Data Sheets
2
References
0
画像
AllPrep DNA/RNA procedure
AllPrep DNA/RNA操作手順
Simultaneous purification of total RNA and genomic DNA
トータルRNAおよびゲノムDNAの同時精製
AllPrepテクノロジー(AllPrep DNA/RNA Mini Kit)を用いてラット肝臓サンプル10 mgからトータルRNAとゲノムDNAを精製した。[A] 精製したRNAを1.2%ホルムアルデヒドアガロースゲルで解析した。[B] 精製したDNAを0.8%アガロースゲルで解析した。M:マーカー。
Multiplex PCR of 8 targets
8種類のターゲットのマルチプレックスPCR
AllPrep DNA/RNA Mini Kit を用いてマウス組織からゲノムDNA を精製した。サンプルあたり100 ngのDNAを用いて8種類のターゲット(192~1953 bp、GC含有率は19~61%)のマルチプレックスPCRを行なった。M:マーカー、NTC:テンプレートを含まないコントロール、Li:肝臓、K:腎臓、Lu:肺。
Wide dynamic range
幅広いダイナミックレンジ
AllPrep DNA/RNA Micro Kitを用いて腎臓ホモジネートの10倍連続希釈液からゲノムDNAとトータルRNAを精製した。各希釈液ごとにDNAはduplicates、RNAは4 replicatesで精製した。[A] Pgk1遺伝子のリアルタイムPCR解析、および[B] Jun転写物のリアルタイムRT-PCR解析は、5 mgから50 ngの組織で正確な定量が広範囲で行なえたことを示している。
High-quality total RNA
高品質トータルRNA
AllPrep DNA/RNA Mini Kitを用いてJurkat細胞(1 x 106)からトータルRNAを精製し、Agilent 2100 Bioanalyzerで解析した。RIN値が10であることから、RNAが分解されていないことを示す。M:マーカー、18S:18S rRNA、28S:28S rRNA。