Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit

For ultrafast, one-step qRT-PCR using sequence-specific probes on Rotor-Gene cyclers

Optimized for ultrafast, reliable results on Rotor-Gene cyclers
Sensitive detection of even low copy numbers
Accurate detection of a wide range of template amounts
Specially formulated, ready-to-use master mix for fast cycling

The Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit is designed for use with the Rotor-Gene Q and other Rotor-Gene cyclers, providing ultrafast, highly sensitive quantification of RNA targets with real-time one-step RT-PCR using sequence-specific probes. Outstanding performance is achieved through the combination of a specially optimized master mix and the unique Rotor-Gene cycler. For convenience, the master mix can be stored at 2–8°C.

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製品名		Cat. no.	List price:
Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit (400) For 400 x 25 µl reactions: 3 x 1.7 ml 2x Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix, 100 µl Rotor-Gene RT Mix, 2 x 2 ml RNase-Free Water		204574	¥87,500

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Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit は分子生物学実験用です。疾病の診断、治療または予防の目的には使用することはできません。

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配列特異的プローブを用いた高感度検出|プライマーの特異的なアニーリング|プライマーの高速なアニーリング|

ヒト白血球RNA の10 倍段階希釈液（100 ng～1 ng）をテンプレートとして、1 ステップリアルタイムRT-PCR で使用した。IL12RB1（interleukin 12 receptor, beta 1）用TaqMan Gene Expression Assay を用いてtriplicate で反応を行なった。Rotor-Gene Q とRotor-Gene Probe RT-PCR Kit を用いた場合[A] 、A_II社の装置とキットを用いた場合[B] よりも、非常に感度の高い結果（C_T値が低い）が得られた。|Rotor-Gene Q PCRバッファー中の陽イオンによりプライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K⁺は二本鎖DNAのリン酸基に結合し、プライマーのアニーリングを安定化する。NH₄⁺は、ミスマッチな塩基対間の水素結合を不安定化する。|[A] Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix 中のQ-Bondは、短い一本鎖DNAへのDNAポリメラーゼの結合アフィニティーを大幅に増大させるため、プライマーのアニーリング時間を数秒間に短縮できる。さらにDNAの融解をサポートするユニークなバッファー組成が、変性およびエクステンション時間を短縮する。[B] Q-Bondが存在しないと、プライマーとポリメラーゼが段階的にテンプレートに結合するのでプライマーのアニーリングに時間がかかる。|

パフォーマンス

With the Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit, low-abundance transcripts are reliably quantified (see figure "Sensitive detection using a sequence-specific probe").

原理

The Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit enables reliable quantification of RNA templates on the Rotor-Gene Q without the need for optimization of reaction and cycling conditions. The kit is designed for use with hydrolysis probes (e.g., TaqMan® probes). RNA is used as the template in a reaction where reverse transcription and PCR take place sequentially in the same reaction vessel. Since it is not necessary to transfer the finished RT reaction to another tube for PCR, the real-time RT-PCR procedure is streamlined, making high-throughput analysis possible.

Highly specific amplification is assured through a balanced combination of K⁺ and NH₄⁺ ions, which promote specific primer annealing, enabling high PCR specificity and sensitivity (see figure "Specific primer annealing"). Fast cycling without compromising performance is achieved using Q-Bond, a novel PCR additive that considerably shortens cycler run times (see figure "Fast primer annealing").

Components of 2x Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit*
Component	Features	Benefits
HotStarTaq Plus DNA Polymerase	5 min activation at 95ºC	Set up of qPCR reactions at room temperature
Rotor-Gene Probe RT-PCR Buffer	Balanced combination of NH₄⁺ and K⁺ ions	Specific primer annealing ensures reliable qPCR results
Rotor-Gene Probe RT-PCR Buffer	Unique Q-Bond additive	Faster PCR run times enable faster results and more reactions per day
Rotor-Gene RT Mix	Special blend of reverse transcriptases with a high affinity for RNA	RNA can be transcribed in just 10 minutes, even through complex secondary structures

操作手順

The ready-to-use Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix eliminates the need for optimization of reaction and cycling conditions. Just add template RNA, primers, probe, and the supplied reverse transcriptase mix to the master mix and program the cycler. Instructions are provided in the detailed handbook supplied with the kit.

Hydrolysis probes (e.g., TaqMan® probes) can be used in combination with the Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit on the Rotor-Gene Q for fast and sensitive quantification — simply add the primer-probe mix and template to the master mix.

アプリケーション

The Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit is well suited for use in fast, real-time one-step RT-PCR of RNA targets using sequence specific probes on the Rotor-Gene Q. It is also compatible with Rotor-Gene 3000 and Rotor-Gene 6000 cyclers.

Feature	Specifications
Applications	Real-time quantification of RNA targets
Description	For ultrafast quantitative real-time one-step RT-PCR using sequence-specific probes
Reaction type	Real-time one-step RT-PCR
Real-time or endpoint	Real-time
Sample/target type	RNA
Single or multiplex	Single
SYBR Green I or sequence-specific probes	Sequence-specific probes
Thermal cycler	Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000
With or without ROX	Without ROX dye

パンフレット

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	(EN) - Rotor-Gene Q - Pure Detection Now with even more applications!	詳細を表示
	(JA) - Rotor-Gene Q 優れた温度均一性を実現するリアルタイムPCR 装置	詳細を表示

FAQ

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	How do you achieve fast cycling, yet still deliver the same performance in PCR as that achieved with standard cycling? FAQ ID -1430	表示
	Are Rotor-Gene Kits compatible with reaction setup using the QIAgility instrument? FAQ ID -2116	表示
	Do the master mixes in Rotor-Gene Kits contain dUTP to allow UNG pretreatment? FAQ ID -2117	表示
	Why is the initial activation step different for Rotor-Gene Probe, SYBR Green and Multiplex Kits? FAQ ID -2118	表示
	What are the main differences between Rotor-Gene and QuantiTect or QuantiFast PCR Kits? FAQ ID -2119	表示
	Will Rotor-Gene Kits also work on the Rotor-Gene 6000 and 3000 cyclers? FAQ ID -2121	表示
	Do you have any information or guidelines regarding the choice of reference genes for real-time PCR? FAQ ID -2371	表示
	How important is the RNA purification process, for obtaining reliable qRT-PCR results? FAQ ID -2655	表示
	What is the threshold cycle or Ct value? FAQ ID -2682	表示

キットハンドブック

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	(EN) - Rotor-gene Probe Handbook For fast real-time PCR, two-step RT-PCR, and one-step RT-PCR using sequence-specific probes on Rotor-gene cyclers.	詳細を表示
	(JA) - Rotor-Gene Probe プロトコールとトラブルシューティング Rotor-Gene Probe PCR Kit Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit 配列特異的なプローブとRotor-Gene サイクラーを用いた迅速なリアルタイムPCR、2ステップRT-PCR、1ステップRT-PCR	詳細を表示

MSDS

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	Safety Data Sheets Download Safety Data Sheets for QIAGEN product components.	表示

安全データシート

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	MSDS Rotor-Gene Probe RT-PCR Kit (400)

画像

Sensitive detection using sequence-specific probe

配列特異的プローブを用いた高感度検出

Specific primer annealing using a balanced combination of K+ and NH4+ ions

プライマーの特異的なアニーリング

Rotor-Gene Q PCRバッファー中の陽イオンによりプライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K⁺は二本鎖DNAのリン酸基に結合し、プライマーのアニーリングを安定化する。NH₄⁺は、ミスマッチな塩基対間の水素結合を不安定化する。

プライマーの高速なアニーリング

[A] Rotor-Gene Probe RT-PCR Master Mix 中のQ-Bondは、短い一本鎖DNAへのDNAポリメラーゼの結合アフィニティーを大幅に増大させるため、プライマーのアニーリング時間を数秒間に短縮できる。さらにDNAの融解をサポートするユニークなバッファー組成が、変性およびエクステンション時間を短縮する。[B] Q-Bondが存在しないと、プライマーとポリメラーゼが段階的にテンプレートに結合するのでプライマーのアニーリングに時間がかかる。